[發(fā)明專利]一種幽門螺旋桿菌膠體金分型檢測裝置及其制備方法

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• 申請日: 2021-12-01
• 公開（公告）號: CN114113596A
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發(fā)明（設計）人: 尹鴻萍;覃快
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種幽門螺旋桿菌膠體金分型檢測裝置及其制備方法，檢測裝置包括底板，在所述底板的表面依次排列樣品墊、膠體金結(jié)合墊、層析膜和吸收墊這四個部件，所述膠體金結(jié)合墊上包含膠體金標記抗人IgG的單抗；所述層析膜上設有包被有重組幽門螺桿菌細胞毒(CagA)抗原、重組幽門螺桿菌空泡毒(VacA)抗原和重組幽門螺桿菌尿素酶亞單位B蛋白(UreB)抗原的三條檢測線和包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體的質(zhì)控線，且上述的三條檢測線及質(zhì)控線相互平行。該檢測裝置操作簡單，適用范圍廣，檢測成本低，適用于臨床檢測、現(xiàn)場調(diào)查、以及流行病學調(diào)查。

技術領域

本發(fā)明涉及免疫檢測領域，特別是指一種幽門螺桿菌膠體金分型檢測裝置及其制備方法。

背景技術

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)是一種革蘭陰性，微需氧桿菌。Hp感染與多種疾病密切相關，包括慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關淋巴組織淋巴瘤、胃癌等消化系統(tǒng)疾病。我國是幽門螺桿菌感染的高發(fā)國家，感染率在50％以上，但因為幽門螺桿菌致病性不一致(分為低毒型和高毒型)，并不是所有的幽門螺桿菌感染均需要進行治療。故診斷出是否被幽門螺桿菌感染以及被何種幽門螺桿菌感染對臨床治療具有重要的指導意義。

幽門螺桿菌的檢測方法根據(jù)是否需要內(nèi)窺鏡輔助分為非侵入性和侵入性檢查。侵入性檢查包括內(nèi)窺鏡檢查、快速尿素酶試驗、細菌培養(yǎng)、組織病理檢查。侵入性方法主要通過內(nèi)窺鏡取得活檢組織，進一步進行組織學檢測。但這些方法往往會給患者帶來侵入性痛苦，需要一定的條件和技術，并且費時又費力，不利于臨床大批量的快速檢測。

非侵入性檢查包括尿素呼氣試驗、血清學檢查、糞便抗原檢測。非侵入性檢查能有效避免侵入性痛苦，但這些方法或耗時且費用高，或無法區(qū)分活動性感染和過去感染，或診斷準確性易受樣本存儲的影響，并且以上方法都不能進行分型檢測。

現(xiàn)有的檢測幽門螺桿菌的主流技術只能判斷是否感染幽門螺桿菌而無法進行分型檢測，未解決此問題，本發(fā)明由此而來。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種幽門螺桿菌膠體金分型檢測裝置及其制備方法，以解決現(xiàn)有技術中檢測幽門螺桿菌技術的缺陷。

本發(fā)明采取的技術方案是：一種幽門螺桿菌的膠體金分型檢測裝置，所述檢測裝置包括底板，在所述底板的表面依次排列樣品墊、膠體金結(jié)合墊、層析膜和吸收墊這四個部件，所述膠體金結(jié)合墊上包含膠體金標記抗人IgG的單抗；所述層析膜上設有包被有重組HP細胞毒(CagA)抗原、重組HP空泡毒(VacA)抗原和重組HP尿素酶亞單位B蛋白(UreB)抗原的三條檢測線和包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體的質(zhì)控線，且上述的三條檢測線及質(zhì)控線相互平行。

優(yōu)選地，所述質(zhì)檢測線上包被的重組HP細胞毒(CagA)抗原、重組HP空泡毒(VacA)抗原、和重組HP尿素酶亞單位B蛋白(UreB)抗原的包被濃度為1～10mg/mL；質(zhì)控線上包被的羊抗鼠IgG多克隆抗體最佳包被濃度為2～10mg/mL。

優(yōu)選地，所述層析膜上設有的三條檢測線距離加樣端較近一側(cè)，質(zhì)控線距離加樣端較遠一側(cè)。

優(yōu)選地，各個檢測線之間間距為4～10mm；最后一條檢測線和質(zhì)控線的間距為3～10mm。

優(yōu)選地，樣品墊、膠體金結(jié)合墊、層析膜和吸收墊這四個部件，相鄰兩部件間邊緣重疊。

本發(fā)明提供一種幽門螺桿菌膠體金分型檢測裝置的制備方法，包括如下步驟：

A、采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金；

B、將所述鼠抗人IgG單抗與膠體金，在最佳pH值下進行偶聯(lián)制得膠體金標記的鼠抗人IgG單克隆抗體溶液，并噴涂于膠體金結(jié)合墊上，干燥備用；