[發明專利]S蛋白基因及其在豬δ冠狀病毒疫苗中的應用

在審

• 申請號: 202111449183.1
• 申請日: 2021-11-29
• 公開（公告）號: CN114317564A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 于義娟;薛霜;王碧群;鄭良益;朱薇;謝紅玲;石寶蘭;漆世華;王威;閔娟娟;秦濤;胡玉立;徐松;舒銀輝;秦紅剛;饒清宜;付寧寧;王明哲;黃濤;劉希健;李婷婷;周平
• 申請（專利權）人: 國藥集團動物保健股份有限公司
• 主分類號: C12N15/50
• 分類號: C12N15/50;C07K14/165;C12N15/74;C12N1/21;A61K39/215;A61P31/14;C12R1/245
• 代理公司: 深圳市世紀恒程知識產權代理事務所 44287
• 代理人: 高莎

本發明公開一種S蛋白基因及其在豬δ冠狀病毒疫苗中的應用，所述S蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本發明提供的豬δ冠狀病毒疫苗包含由S蛋白基因編碼出的S蛋白，或裝有S蛋白基因的重組質粒轉化得到的重組菌菌液，該疫苗不僅能夠在病毒主要靶器官小腸腸道黏膜上定居，能夠有效防治PDCoV，且在使用時沒有活毒傳播風險，安全性良好，對動物健康和生態環境無潛在的影響和威脅；此外，由重組菌菌液直接制備得到的疫苗不需要經過純化工序，生產工藝簡單易實現，生產效率高、成本低。

技術領域

本發明涉及獸用生物制品技術領域，特別涉及一種S蛋白基因及其在豬δ冠狀病毒疫苗中的應用。

背景技術

豬丁型冠狀病毒又稱豬δ冠狀病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)，是一種新出現的可導致豬發生嚴重腹瀉甚至死亡的冠狀病毒。PDCoV可以感染各個階段的豬群，但主要感染哺乳仔豬，引起嚴重的萎縮性腸炎，臨床癥狀表現為仔豬腹瀉、嘔吐、脫水，引起小豬的死亡率30％～40％，給養豬業帶來了較重的經濟損失。因此，研制有效的疫苗進行該病的防控是急需解決的問題。

發明內容

本發明的主要目的是提出一種S蛋白基因及其在豬δ冠狀病毒疫苗中的應用，該豬δ冠狀病毒疫苗能夠有效防治PDCoV，且在使用時安全性良好。

為實現上述目的，本發明提出一種S蛋白基因，所述S蛋白基因的核苷酸序列如SEQID NO：1所示。

本發明還提出一種S蛋白，由如上文所述的S蛋白基因編碼得到，其特征在于，所述S蛋白具有如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

本發明還提出一種重組質粒，所述重組質粒包括如上文所述的S蛋白基因。

可選地，包含乳酸菌表達載體pVE5523。

本發明還提出一種重組菌株，所述重組菌株包含如上文所述的S蛋白基因。

可選地，所述重組菌株由攜帶所述S蛋白基因的重組質粒轉化干酪乳桿菌標準菌株ATCC393獲得。

本發明還提出一種豬δ冠狀病毒疫苗，所述豬δ冠狀病毒疫苗包括如上文所述的S蛋白，或如上文所述的重組菌株的菌液。

可選地，包括所述重組菌株菌液和凍干保護劑；和/或，

所述重組菌株菌液的OD600為1.0～1.2。

可選地，所述豬δ冠狀病毒疫苗為口服疫苗。

本發明還提出一種豬δ冠狀病毒疫苗的制備方法，包括以下步驟：

培養如上文所述的重組菌株得到菌液，將菌液凍干處理，得到豬δ冠狀病毒疫苗。

本發明提供的豬δ冠狀病毒疫苗包含由S蛋白基因編碼出的S蛋白，或裝有S蛋白基因的重組質粒轉化得到的重組菌菌液，該疫苗不僅能夠在病毒主要靶器官小腸腸道黏膜上定居，能夠有效防治PDCoV，且在使用時沒有活毒傳播風險，安全性良好，對動物健康和生態環境無潛在的影響和威脅；此外，由重組菌菌液直接制備得到的疫苗不需要經過純化工序，生產工藝簡單易實現，生產效率高、成本低。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅為本發明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。

圖1為實施例1中合成的pUC57-PDCoVS質粒雙酶切后的瓊脂糖凝膠電泳圖；

圖2為實施例1中重組質粒pVE5523-PDCoVS質粒雙酶切后的瓊脂糖凝膠電泳圖。