[發(fā)明專利]一種單純性高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型及其構(gòu)建方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111448584.5
• 申請(qǐng)日: 2021-11-30
• 公開（公告）號(hào): CN114271234B
• 公開（公告）日: 2022-11-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳玉龍;陳鏑;張欣;孫霞;侯穎;賈敏;秦巧紅;蘇興利
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西安醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): A01K67/02
• 分類號(hào): A01K67/02
• 代理公司: 北京酷愛智慧知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11514
• 代理人: 劉志剛

本發(fā)明公開了一種單純性高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型及其構(gòu)建方法，該構(gòu)建方法包括如下步驟：將純合子小鼠yap1^Flox/Flox與Alb?Cre⁺小鼠進(jìn)行雜交獲得yap1^Flox/??Alb?Cre⁺的F1小鼠；F1代小鼠自交，獲得雄性yap1^Flox/Flox?Alb?cre⁺小鼠，記為yap1^ΔHep小鼠；根據(jù)血液中總膽汁酸的含量對(duì)yap1^ΔHep小鼠進(jìn)行篩選；以動(dòng)脈粥樣硬化飼料飼養(yǎng)篩選得到的yap1^ΔHep小鼠，即得所述單純性高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型。本發(fā)明構(gòu)建方法可形成單純性高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型(即血漿TC呈高水平，而血漿TG呈正常水平)；為探討TG或其他心血管危險(xiǎn)因子在動(dòng)脈粥樣硬化中作用機(jī)制提供理想模型。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及小鼠模型技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種單純性高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型及其構(gòu)建方法。

背景技術(shù)

血漿總膽固醇(TC)≥190mg/dL是高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病(包括心肌梗死、中風(fēng)和外周血管疾病)的主要風(fēng)險(xiǎn)因子。換而言之，高水平的TC是動(dòng)脈粥樣硬化形成的前提。研究發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病患者中，血漿甘油三脂(TG)的水平顯著升高，即出現(xiàn)高甘油三脂血癥(TG≥150mg/dL)。這提示，高水平TG與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)。然而，TG在動(dòng)脈粥樣硬化形成中扮演何種角色仍需進(jìn)一步明確。

低密度脂蛋白受體敲除小鼠(LDLR^-/-)為經(jīng)典的高膽固醇血癥模型。動(dòng)脈粥樣硬化飼料可誘導(dǎo)LDLR^-/-小鼠產(chǎn)生高膽固醇血癥，另外，尾靜脈注射過表達(dá)前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草桿菌素9型獲得性突變體(PCSK9)的血清型8型腺相關(guān)病毒(AAV8(AAV8-PCSK9)后，飼喂動(dòng)脈粥樣硬化飼料也能夠誘導(dǎo)野生型小鼠產(chǎn)生肝膽固醇血癥。然而，以上兩種高膽固醇血癥模型均伴隨著高甘油三脂血癥。目前，單純的高膽固醇血癥小鼠模型的缺乏阻礙了TG在動(dòng)脈粥樣硬化作用機(jī)制的研究。因此，構(gòu)建單純的高膽固醇血癥小鼠模型十分必要和緊迫。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種單純性高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型及其構(gòu)建方法，該構(gòu)建方法能夠構(gòu)建得到單純性高膽固醇血癥小鼠模型，即TC呈高水平，而TG呈正常水平。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明第一方面提供一種單純性高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型的構(gòu)建方法，所述構(gòu)建方法包括如下步驟：

(a)將純合子小鼠yap1^Flox/Flox與Alb-Cre⁺小鼠進(jìn)行雜交獲得yap1^Flox/--Alb-Cre⁺的F1小鼠；F1代小鼠自交，獲得雄性yap1^Flox/Flox-Alb-cre⁺小鼠，記為yap1^ΔHep小鼠；

(b)根據(jù)血液中總膽汁酸的含量對(duì)yap1^ΔHep小鼠進(jìn)行篩選；

(c)以動(dòng)脈粥樣硬化飼料飼養(yǎng)篩選得到的yap1^ΔHep小鼠，即得所述單純性高膽固醇血癥和動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型。

本發(fā)明中對(duì)步驟(a)中純合子小鼠yap1^Flox/Flox的構(gòu)建方法不作嚴(yán)格限制，例如，可以采用本領(lǐng)域的常規(guī)的得到；優(yōu)選地，采用專利申請(qǐng)?zhí)枮?02010654534.1中的方法得到(具體可參見具體實(shí)施方式)。

優(yōu)選地，所述根據(jù)血液中總膽汁酸的含量對(duì)yap1^ΔHep小鼠進(jìn)行篩選為篩選血液中總膽汁酸含量≥146μmol/L的yap1^ΔHep小鼠。