[發(fā)明專(zhuān)利]新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111442711.0
• 申請(qǐng)日: 2021-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114891753A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-08-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 于可響;黃兵;李玉峰;叢雁方;于春梅;商敏;路曉;劉麗萍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所（山東省無(wú)特定病原雞研究中心）;青島蔚藍(lán)生物股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N7/00
• 分類(lèi)號(hào): C12N7/00;C12N15/46;A61K39/15;A61P31/14;G01N33/569
• 代理公司: 北京國(guó)坤專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 11491
• 代理人: 趙紅霞

本發(fā)明公開(kāi)了一株新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株，已于2021年05月25日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC NO：V202144，保藏地址為：中國(guó)武漢武漢大學(xué)。本發(fā)明還公開(kāi)了以該致弱毒株為種毒的新型鴨呼腸孤病毒活疫苗。本發(fā)明的新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株，是在雞胚成纖維細(xì)胞上傳代后經(jīng)克隆純化而得的自然缺失弱毒株，毒力顯著降低，接種雛鴨無(wú)不良反應(yīng)，是具有較高安全性的疫苗候選弱毒株。以該弱毒株研制的疫苗免疫雛鴨可有效抵擋強(qiáng)毒攻擊，安全性高，不返強(qiáng)，遺傳穩(wěn)定性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株及其應(yīng)用，屬于動(dòng)物醫(yī)學(xué)疫苗領(lǐng)域。

背景技術(shù)

禽呼腸孤病毒(avian reovirus，ARV)屬于呼腸孤病毒科、正呼腸孤病毒屬，病毒粒子無(wú)囊膜，為20面體對(duì)稱(chēng)，基因組為線(xiàn)性雙股RNA，分10個(gè)節(jié)段，極易發(fā)生基因重配與突變。該病毒宿主廣泛，可感染多種禽類(lèi)。

目前禽呼腸孤病毒在我國(guó)主要存在3種不同致病型：1、由雞呼腸孤病毒(Chickenreovirus,CRV)引起的雞病毒性關(guān)節(jié)炎、矮小綜合征等，主要表現(xiàn)關(guān)節(jié)炎、腱鞘炎、生長(zhǎng)發(fā)育不良；2、由番鴨呼腸孤病毒(Muscovy duck reovirus,MDRV)引起的番鴨、鵝“花肝病”，主要表現(xiàn)肝臟有黃白色壞死灶；3、由新型鴨呼腸孤病毒(Novel Duck Reovirus,NDRV)引起的鴨鵝“脾壞死病”，主要表現(xiàn)肝脾壞死和出血。造成這3種疾病的禽類(lèi)呼腸孤病毒無(wú)論從流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化，還是從基因序列和血清學(xué)等方面，均表現(xiàn)出較大的差異。

新型鴨呼腸孤病毒可以感染櫻桃谷鴨、麻鴨、番鴨、半番鴨、野鴨、鵝等多個(gè)水禽品種，主要引起雛鴨發(fā)病死亡，成年鴨感染不表現(xiàn)癥狀，但能垂直傳播，引起后代雛鴨發(fā)病。該病在2005年前后在中國(guó)南方一些省份，如福建、廣東、浙江等地的鴨群中開(kāi)始出現(xiàn)，后蔓延至全國(guó)主要養(yǎng)鴨區(qū)。目前該病在中國(guó)已成為常見(jiàn)病、多發(fā)病。發(fā)病日齡一般為5～25日齡，其中以7～14日齡居多，發(fā)病率5％～35％，死亡率2％～20％，一般發(fā)病鴨日齡愈小，發(fā)病率和死亡率愈高。該病毒能引起患鴨脾臟壞死、法氏囊損傷，導(dǎo)致免疫抑制，極易繼發(fā)細(xì)菌感染，且很難治療，從而造成更高的死亡率，給我國(guó)的養(yǎng)鴨業(yè)造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。目前該病尚無(wú)商品化的疫苗。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一株新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株，及其在防治新型鴨呼腸孤病毒中的應(yīng)用，在制備新型鴨呼腸孤病毒弱毒疫苗中的應(yīng)用，在制備防治新型鴨呼腸孤病毒的藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一株新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株——DE150株，已于2021年05月25日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC NO：V202144，保藏地址為：中國(guó)武漢武漢大學(xué)，郵編430072。

該毒株是由強(qiáng)毒株DE株突變而得，突變至少包括以下5個(gè)σC基因上的核苷酸突變位點(diǎn)和4個(gè)氨基酸突變位點(diǎn)：

核苷酸突變位點(diǎn)：第41位C突變?yōu)門(mén)，第201位C突變?yōu)門(mén)，第218位T突變?yōu)镚，第851位T突變?yōu)镃，第924位T突變?yōu)镚；

氨基酸突變位點(diǎn)：第14位P突變?yōu)長(zhǎng)，第73位L突變?yōu)镽，第284位L突變?yōu)镾，第308位N突變?yōu)镵。

所述新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株在防治新型鴨呼腸孤病毒中的應(yīng)用。

所述新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株在制備新型鴨呼腸孤病毒弱毒疫苗中的應(yīng)用。

所述新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株在制備防治新型鴨呼腸孤病毒的藥物中的應(yīng)用。

所述新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株在制備防治由新型鴨呼腸孤病毒引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。

一種新型鴨呼腸孤病毒弱毒疫苗，是以上述新型鴨呼腸孤病毒傳代致弱毒株為種毒的新型鴨呼腸孤病毒活疫苗。