[發明專利]一種外加電場作用下微流控離心式擠壓的細胞轉染系統

在審

• 申請號: 202111437337.5
• 申請日: 2021-11-29
• 公開（公告）號: CN114181825A
• 公開（公告）日: 2022-03-15
• 發明（設計）人: 陳建鋒;柳菡;宋一羽;陳雪飛;侯冉;陳笑笑;易美榮;鐘敏;許文虎
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: C12M1/42
• 分類號: C12M1/42;C12M1/00;C12N15/87;B01L3/00
• 代理公司: 南昌金軒知識產權代理有限公司 36129
• 代理人: 石英

1.一種外加電場離心擠壓式的微流控細胞轉染系統，包括上亞克力光盤碟體，所述上亞克力光盤碟體與下光盤體通過卡榫或是凹凸嵌合的方式進行連接；其特征在于：還包括下亞克力光盤碟體和電場提供裝置；

所述下亞克力光盤碟體設置在所述上亞克力光盤碟體下方；

所述上亞克力光盤碟體與所述下亞克力光盤碟體組成雙層復合碟體架；

所述雙層復合碟體架于離心平臺上；

所述下亞克力光盤碟體刻劃多組微流道；

所述下亞克力光盤碟體設有數個儲存槽；

所述儲存槽包括前儲存槽和后儲存槽；

所述前存儲槽含有兩個輸液孔；

所述后儲存槽下方設置微流閥門；

所述電場提供裝置包括正極、負極、滑環。

2.根據權利要求1所述的一種外加電場離心擠壓式的微流控細胞轉染系統，其特征在于：所述上亞克力光盤碟體為密封且透明。

3.根據權利要求1所述的一種外加電場離心擠壓式的微流控細胞轉染系統，其特征在于：所述微流道為沙漏狀微流體通道，具有受限空間。

4.根據權利要求1所述的一種外加電場離心擠壓式的微流控細胞轉染系統，其特征在于：所述電場提供裝置提供向下電場。

5.根據權利要求1所述的一種外加電場離心擠壓式的微流控細胞轉染系統，其特征在于：所述滑環可用于防止導線繞線。

6.一種可用于權利要求1-5任一所述的一種外加電場離心擠壓式的微流控細胞轉染系統的方法，包括以下步驟：

準備階段：

S1:將上亞克力光盤碟體與下亞克力光盤碟體通過卡榫或是凹凸嵌合的方式進行連接，形成一個雙層復合碟體之后，架于離心平臺上；

S2:將待轉染細胞與轉染物質依次注入前儲存槽的兩個輸液孔，輸入液體在毛細力作用下存儲在前儲存槽中；

S3:將正負極電路連接完畢，使其產生向下的電場；

實驗階段：

S4:啟動離心平臺；

當微流體碟體處于低轉速離心時，液體在儲存槽通往微流閥門的入口處會形成一層液氣表面，此時液體的內部有在離心作用下所形成的液體壓力，而在液氣表面上會因表面張力產生一阻止液體前進的毛細壓力，當液體壓力低于毛細壓力時，液體會保留在儲存槽中，而隨著離心轉速提高，液體壓力跟著增加，直到液體所受的離心力大于毛細壓力時，便會突破微流道限位口，細胞通過離心力的作用通過微流道。此時細胞的細胞膜被限位口擠壓，在短時間內發生細胞膜破裂，待輸運的物質在后儲存槽內通過暫時破裂的細胞膜進入細胞內，同時細胞收到電場影響，在短時間內發生細胞核膜破裂，待輸運的物質通過破裂的細胞核膜進入細胞核內，一段時間后細胞的細胞膜、細胞核膜恢復，完成各種物質的細胞內輸運。

取樣階段：

S5:通過吸管從后儲存槽下方設置的微流閥門將細胞懸浮液吸出。