[發(fā)明專利]一種新型細(xì)胞培養(yǎng)液緩解關(guān)節(jié)炎疼痛海綿貼

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111433133.4
• 申請(qǐng)日: 2021-11-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114099477A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙鋼;王明杰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州諾威百奧生物科技有限公司;河南贏聞信息科技有限公司
• 主分類號(hào): A61K9/70
• 分類號(hào): A61K9/70;A61K35/51;A61K47/46;A61M37/00;A61P19/02;A61P29/00;C12N5/0775
• 代理公司: 北京中企鴻陽(yáng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11487
• 代理人: 蘇艷

本發(fā)明提出了一種新型細(xì)胞培養(yǎng)液緩解關(guān)節(jié)炎疼痛海綿貼，包括長(zhǎng)形膠布和圓形紗布，所述圓形紗布設(shè)置在所述長(zhǎng)形膠布上，其中，所述圓形紗布為水解海綿貼，所述水解海綿貼上含有臍帶干細(xì)胞的外泌體以及水解海綿的混合物。本發(fā)明是利用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)中，在培養(yǎng)上清液分泌出大量細(xì)胞因子蛋白，可以有效的緩解局部炎癥反應(yīng)等功能制備的細(xì)胞培養(yǎng)上清液，同時(shí)利用水解海綿的特性，幫助刺破外表皮層，促使培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子通過(guò)角質(zhì)層順利進(jìn)入到真皮層中的一種全新的方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及干細(xì)胞治療技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種新型細(xì)胞培養(yǎng)液緩解關(guān)節(jié)炎疼痛海綿貼。

背景技術(shù)

臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞，具有極強(qiáng)的分化潛能，可向多個(gè)方向進(jìn)行分化。它在骨、軟骨、肌肉、肌腱、韌帶、神經(jīng)、肝、內(nèi)皮和心肌等組織工程學(xué)方面具有廣闊的臨床應(yīng)用價(jià)值。

經(jīng)研究表明，臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有自分泌和旁分泌功能，能夠在局部分泌多種蛋白，引導(dǎo)細(xì)胞的遷移、分化，改善局部供血功能、消除局部炎癥反應(yīng)。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌的活性蛋白主要涉及促細(xì)胞遷移類、受體類、促細(xì)胞分化類、調(diào)節(jié)類和血管生成等幾類。這些不同種類的活性蛋白在改善修復(fù)靶器官組織功能、抗炎、抗凋亡、免疫調(diào)節(jié)等方面發(fā)揮了重要的作用，是其重要的治療機(jī)制之一。因此采用體外無(wú)動(dòng)物源，無(wú)血清培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)基擴(kuò)增，可實(shí)現(xiàn)干細(xì)胞自身的體外生長(zhǎng)及擴(kuò)增，同時(shí)通過(guò)大量的分泌，使得干細(xì)胞培養(yǎng)液中含有大量的活性蛋白，可以通過(guò)濃縮回收的方法進(jìn)行制備，用于緩解類似于關(guān)節(jié)炎等免疫失調(diào)癥。

但是目前該技術(shù)尚未有用于傳統(tǒng)的海綿貼上。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的旨在至少解決所述技術(shù)缺陷之一。

為此，本發(fā)明的一個(gè)目的在于提出一種新型細(xì)胞培養(yǎng)液緩解關(guān)節(jié)炎疼痛海綿貼，以解決背景技術(shù)中所提到的問(wèn)題，克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明一方面的實(shí)施例提供一種新型細(xì)胞培養(yǎng)液緩解關(guān)節(jié)炎疼痛海綿貼，包括長(zhǎng)形膠布和圓形紗布，所述圓形紗布設(shè)置在所述長(zhǎng)形膠布上，其特征在于，所述圓形紗布為水解海綿貼，所述水解海綿貼上含有臍帶干細(xì)胞的外泌體以及水解海綿的混合物。

由上述任一方案優(yōu)選的是，所述水解海綿貼的制備過(guò)程為：

(1)將臍帶干細(xì)胞體外培養(yǎng)的培養(yǎng)上清液液體放入到分子截留量為1K透析袋中；

(2)將裝有上清液的透析袋放入到盛有生理鹽水的大玻璃燒杯中，4℃下進(jìn)行透析操作；

(3)使用磁力攪拌儀，攪拌玻璃燒杯中生理鹽水，轉(zhuǎn)速為300轉(zhuǎn)/min，每個(gè)8小時(shí)更換一次透析液生理鹽水，持續(xù)透析24小時(shí)，將雜質(zhì)濾除；

(4)將透析好的外泌體產(chǎn)物進(jìn)行蛋白總量檢測(cè)，達(dá)到含量為90-110ug/ml，為標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)物；

(5)取出100ml的總蛋白含量達(dá)到10ug/ml左右的透析好的外泌體，將50mg的水解海綿針混入到其中，充分混勻；

(6)將藥用紗裁制成兩層，裁切成直徑1CM的圓形，然后浸入到含有水解海綿針的已經(jīng)透析好的干細(xì)胞培養(yǎng)上清液中，反復(fù)浸濕，然后取出；

(7)浸濕后的紗布，37℃烘干2小時(shí)即得水解海綿貼。

由上述任一方案優(yōu)選的是，所述臍帶干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程為：

(1)完全培養(yǎng)基：采用的無(wú)動(dòng)物源血清，加雙抗的基礎(chǔ)干細(xì)胞培養(yǎng)基；

(2)制備：使用生理鹽水充分洗滌臍帶，并剪成小段，去除動(dòng)脈和靜脈，撕取華通膠至少8ml，充分剪碎后平分至4瓶已加25ml完全培養(yǎng)基的175cm2培養(yǎng)瓶中，靜置培養(yǎng)7天，第8天根據(jù)生長(zhǎng)情況，進(jìn)行換液、傳代；