[發明專利]一種無蛋白豬偽狂犬病活疫苗耐熱保護劑及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202111430924.1
• 申請日: 2021-11-29
• 公開（公告）號: CN114028576B
• 公開（公告）日: 2022-12-06
• 發明（設計）人: 耿興良;楊靈芝;朱杰;翟慶賀;楊平;李香云
• 申請（專利權）人: 山東濱州沃華生物工程有限公司
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;A61K47/32;A61K47/02;A61K47/12;A61K47/18;A61K47/26;A61K9/19;A61K39/245;A61P31/22
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 張貴賓

本發明涉及獸用生物制品制造領域，特別公開了一種無蛋白豬偽狂犬病活疫苗耐熱保護劑及其制備方法與應用。該豬偽狂犬病活疫苗耐熱保護劑，其特征在于：由等體積的A液和B液組成，所述A液由殼聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和水制成；所述B液由羥乙基淀粉、乳酸鈣、右旋糖酐、精氨酸、D?山梨醇、海藻糖和水制成。本發明耐熱保護劑的使用降低了豬偽狂犬病活疫苗產品的儲運要求，解決了豬偽狂犬病活疫苗不能在2?8℃下長期保存和運輸的問題，以及市售耐熱保護劑疫苗存在的應激問題，提高了產品在保存和使用中的穩定性。

技術領域

本發明涉及獸用生物制品制造領域，特別涉及一種無蛋白豬偽狂犬病活疫苗耐熱保護劑及其制備方法與應用。

背景技術

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒引起的多種家畜以發熱、奇癢(豬除外)、繁殖障礙、腦脊髓炎為主要癥狀的一種高度接觸性傳染病。它是研究皰疹病毒生物學的一個有用的模式病毒。豬偽狂犬病毒的分類學命名為豬皰疹病毒I型，屬于皰疹病毒甲亞科水痘皰疹病毒屬。所有的皰疹病毒都有一個雙股DNA基因組，病毒粒子大小相近(200-250nm)，結構(衣殼、被膜和囊膜)相似，且在生活周期上有潛伏期。PRV由于能感染突觸連接的神經元，也被用做神經細胞線路的“活”追蹤器。世界動物衛生組織(OIE)將其列為B類動物疫病，我國將其列為二類動物疫病。

疫苗免疫是防控該病最為經濟有效的手段，目前市場上的活疫苗主要包括：傳統減毒活疫苗、基因工程載體活疫苗、基因缺失活疫苗和遺傳重組活疫苗等。大多數活疫苗為弱毒疫苗，弱毒疫苗是一種病原致病力減弱但仍具有活力的完整病原疫苗。長期以來，弱毒疫苗因其獨特的優勢在防控豬傳染病方面發揮了重要作用。傳統疫苗凍干產品一般是采用5%右旋糖酐與10%奶粉作為保護劑，耐熱性能差，且在2-8℃條件下的保存期只有3-6個月，大多需要在-15℃以下保存。疫苗在常規運輸、反復凍融的條件下，毒價損失嚴重，使其免疫效果大大降低。目前市場已有的豬偽狂犬耐熱保護劑含有牛血清白蛋白等成分，在免疫動物上表現出嘔吐、呼吸急促等應激反應。為此，開發一種安全有效的豬偽狂犬耐熱保護劑活疫苗是贏得市場的先決條件。

發明內容

本發明為了彌補現有技術的不足，提供了一種安全性好、穩定性高、便于儲運的無蛋白豬偽狂犬病活疫苗耐熱保護劑及其制備方法與應用。

本發明是通過如下技術方案實現的：

一種無蛋白豬偽狂犬病活疫苗耐熱保護劑，其特征在于：由等體積的A液和B液組成；

所述A液由以下重量分數的物質制成：殼聚糖0.5-5%，聚乙烯吡咯烷酮4-6%，磷酸氫二鉀0.01-1%，磷酸二氫鉀0.01-0.1%，余量為水；

所述B液由以下重量分數的物質制成：羥乙基淀粉0.5-3%，乳酸鈣1-5%，右旋糖酐4-15%，精氨酸0.05-1.5%，D-山梨醇1-5%，海藻糖1-5%，余量為水。

本發明選取多種對豬偽狂犬病活疫苗抗原有特異性耐熱保護作用的成分，通過合理的試驗設計與配方優化，篩選出對豬偽狂犬病活疫苗抗原有耐熱保護效果的復合配方，解決了豬偽狂犬病活疫苗不耐受反復凍融及運輸與保存過程中不耐熱的問題。

進一步優選的，所述A液和B液中的水為注射用水。

上述無蛋白豬偽狂犬病活疫苗耐熱保護劑的制備方法，包括如下步驟：

（1）將殼聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀溶解于水中，滅菌得到A液；

（2）將羥乙基淀粉、乳酸鈣、右旋糖酐、精氨酸、D-山梨醇、海藻糖溶解于水中，過濾除菌得到B液；

（3）將A液和B液按1:1的體積比混勻，得到所述耐熱保護劑。

進一步優選的，步驟（1）中，滅菌條件為116℃下滅菌30min。

進一步優選的，步驟（2）中，過濾除菌是采用0.22μm的除菌過濾器。