[發明專利]一種高效誘導巨噬細胞極化的體外培養方法

在審

• 申請號: 202111421803.0
• 申請日: 2021-11-26
• 公開（公告）號: CN113980902A
• 公開（公告）日: 2022-01-28
• 發明（設計）人: 楊歡;王國華;王洲;孫祥琳;姜正林
• 申請（專利權）人: 南通大學
• 主分類號: C12N5/0786
• 分類號: C12N5/0786;C12Q1/6881;G01N33/569
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 曹振中

1.一種高效誘導巨噬細胞極化的體外培養方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟1、在無血清條件下，將THP-1單核細胞用 PMA和 GM-CSF刺激，使其分化為巨噬細胞；

步驟2、使用20 ng/mL IFN-γ與100 ng/mL LPS誘導步驟1所分化的巨噬細胞24 h得到M1型巨噬細胞；

步驟3、使用20 ng/mL IL-4與20 ng/mL IL-10誘導步驟1所分化的巨噬細胞24 h后得到M2型巨噬細胞。

2.根據權利要求1所述的體外培養方法，其特征在于：所述步驟1中THP-1單核細胞由以下步驟分化為巨噬細胞：先將THP-1單核細胞在含10%胎牛血清的RPMI1640 培養基中進行培養擴增，然后換用無血清培養基，用100 ng/mL PMA和10 ng/mL GM-CSF刺激24 h，分化為巨噬細胞。

3.根據權利要求1所述的體外培養方法，其特征在于：所述步驟1分化的巨噬細胞置于RPMI1640 培養基中培養待用。

4.一組用于鑒定巨噬細胞基因水平的標志物，其特征在于，包括IL-1β、iNOS、Arg1、CD206、CD86，其中，IL-1β、iNOS、CD86為M1型巨噬細胞表面標志物，Agr1、CD206為M2型巨噬細胞表面標志物。