[發明專利]一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法

有效

• 申請號: 202111396046.6
• 申請日: 2021-11-23
• 公開（公告）號: CN114073226B
• 公開（公告）日: 2023-10-27
• 發明（設計）人: 顧玉紅;李寒;李迎超;劉炳響;孫權;范青;鄭奕宸;張雪梅;齊國輝;郭素萍
• 申請（專利權）人: 河北農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京律文知識產權代理有限公司 16189
• 代理人: 蘇士瑩

1.一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)剪下樹莓莖上葉柄；

(2)在超凈工作臺內，將所述葉柄用質量濃度75％的酒精消毒，無菌水漂洗；

(3)將經消毒、無菌水漂洗的葉柄接種至培養基中暗培養。

2.根據權利要求1所述的一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，步驟(1)所述葉柄為距莖尖0.5～3.0cm、健康嫩葉的葉柄。

3.根據權利要求1所述的一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，步驟(1)所述葉柄粗度為1.5～4.0mm，把葉柄剪成長度為0.5～2.0cm的小段。

4.根據權利要求1所述的一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，所述步驟(2)的具體操作為：在超凈臺入口處，將所述葉柄裝入超凈臺內的、經高壓滅菌的瓶中，之后在瓶中用質量濃度為75％的酒精溶液密閉消毒50～70s，無菌水漂洗。

5.根據權利要求1所述的一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，步驟(2)所述無菌水漂洗為用無菌水漂洗3～5次。

6.根據權利要求1所述的一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，步驟(3)所述培養基為在MS培養基中加入如下質量濃度的組分：6-BA0.1～0.5mg·L^-1、2,4-D 0.5～1.5mg·L^-1、NAA 0.2～0.8mg·L^-1、蔗糖20～30g·L^-1和瓊脂5.5～6.0g·L^-1，pH值5.8～6.2。

7.根據權利要求1所述的一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，所述步驟(3)中暗培養的培養溫度25±2℃。

8.根據權利要求1所述的一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，培養期間，統計葉柄的污染率、褐化率、褐死率、膨大率、愈傷組織誘導率，觀察葉柄及其愈傷組織的生長情況。

9.根據權利要求8所述的一種樹莓葉柄的組培快繁的接種方法，其特征在于，所述污染率、褐化率、褐死率、膨大率、愈傷組織誘導率的計算公式如下：