[發明專利]一種牛樟共生真菌YAFEF009及其分離方法

在審

• 申請號: 202111392372.X
• 申請日: 2021-11-23
• 公開（公告）號: CN116004392A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 鄭元;王毅;楊宇明
• 申請（專利權）人: 鄭元;王毅
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/02;A01N63/30;A01P1/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京睿博行遠知識產權代理有限公司 11297
• 代理人: 黃德躍

本發明涉及微生物技術領域，具體公開了一種牛樟共生真菌YAFEF009及其分離方法，牛樟共生真菌YAFEF009的ITS基因序列包括SEQ?ID?No.1所示的核苷酸序列，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC?NO:M?20211255，真菌在MY培養基上生長良好，菌絲是白色呈放射狀向周圍生長，菌絲密集，且菌層較薄，菌落呈規則的圓形狀，通過實驗發現，YAFEF009菌絲體初提物對蠟樣芽孢桿菌、無乳鏈球菌、緩慢芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、溶血性葡萄球菌等細菌具有較好的抗細菌活性，能有效的緩解耐藥菌株帶來的危機，為探究新的抗細菌藥物提供新的途徑，并對開發新型生物農藥提供重要指導依據。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，尤其涉及一種牛樟共生真菌YAFEF009及其分離方法。

背景技術

植物內生菌(Endophyte)概念一詞最早泛指棲息在植物體內，包括寄生、共生和腐生的真菌、細菌、放線菌等一切微生物(Strobel?et?al.,2004；Strobel,2003)。植物共生真菌(Plant?symbiotic?fungi)是指生活史的特定階段或全部階段寄生在植物組織內，而不引起植物產生有害癥狀的微生物，包括菌根真菌以及生活在植物表面的內生真菌和潛伏性病原菌(謝泰祥等,2021)。研究表明，內共生真菌的生物學作用主要包括：提高宿主植物的抗逆性、促進宿主植物的生長發育、加速秸秤降解、天然藥物來源4個方面。在長期進化過程中，共生菌與宿主植物形成了特殊的生理代謝途徑，產生出各種結構新穎的活性化合物。

目前內共生菌的初級代謝和次生代謝產物已成為研究熱點，已經有學者在苦楝(王雅琴等,2007)、香椿(田迪英等,2002；歐陽杰等,2008)、黃芪和黨參(段琦梅等,2012)等多種植物共生菌中發現了具有抗細菌、抗氧化、抗真菌等的天然活性物質。植物的各個部位如葉、花、樹皮和根等均含有豐富的次生代謝產物，部分次生代謝產物具有優良的抗菌活性，尤其對一些耐藥性細菌具有較強的拮抗活性，如生物堿類、萜類、黃酮類、醌類和香豆素類等(Momin?et?al.,2012；Srivastava?et?al.,2014；Elisha?et?al.,2017)，為了殺死植物病菌或者抑制病菌活性，人們發明了抗生素和合成抗菌藥物。隨著抗菌藥物的廣泛應用，致病細菌對抗生素產生耐藥性，甚至出現了多重耐藥性，致病菌耐藥性的發生和蔓延已構成對人類健康的嚴重威脅，研究新的抗菌藥物已經成為一個重大的科研命題。

牛樟(C.kanehirai)是樟科樟屬植物，常綠喬木，全株具樟腦香味，主要用于培養宿生在木材腐朽內壁的牛樟芝，是臺灣特有保護植物(薛聰賢和楊宗愈,2015)。牛樟芝三萜類化合物有保護肝臟、抗腫瘤及抑菌等功能(Shi?et?al.,2011；Du?et?al.,2012；Gokilaet?al.,2013)。Lin等(2018)初步分析鑒定了牛樟莖干的次生代謝產物。Wu等(2017)對牛樟和香樟完整葉綠體基因組序列及化學成分的分析。但關于牛樟共生真菌分離相關研究未見報道。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供了一株抗細菌活性強的牛樟根部共生真菌YAFEF009及其分離方法。

為了實現上述目的，本發明通過如下技術方案實現：

本發明的一株牛樟共生真菌YAFEF009，該菌株為牛樟根部共生真菌YAFEF009；保藏名稱為Gongronella?sp.YAFEF009；保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址是中國武漢大學；保藏日期：2021年10月11日；保藏編號:CCTCC?NO:M20211255。

牛樟共生真菌YAFEF009，所述的牛樟共生真菌YAFEF009的ITS基因序列包括SEQID?No.1所示的核苷酸序列。

進一步的，本發明提供了一種菌劑，其活性成分包括如下(a)(b)(c)中的至少一種：

(a)牛樟共生真菌YAFEF009的發酵液初提物；

(b)牛樟共生真菌YAFEF009細胞的超聲裂解上清；