[發明專利]一種基于miR-1205的幽門螺旋桿菌陽性胃癌檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202111388481.4
• 申請日: 2021-11-22
• 公開（公告）號: CN114107499A
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 王書奎;劉翔翔;潘玉琴;何幫順;秦健;孫慧玲;許桃
• 申請（專利權）人: 南京市第一醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/689;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/01
• 代理公司: 廣東奧益專利代理事務所(普通合伙) 44842
• 代理人: 田樹杰

本發明公開了一種基于miR?1205的幽門螺旋桿菌陽性胃癌檢測試劑盒，包括miR?1205的特異性引物、人源U6基因的特異性引物。本發明以與H.pylori陽性胃癌密切正相關的miR?1205為核心，利用特異性引物進行熒光定量PCR，檢測胃癌組織樣本，具有較高的敏感性和特異性，彌補了現有H.pylori感染檢測手段的不足，為臨床個體化治療提供了幫助；本試劑盒檢測準確性達95.31％，整個檢測過程僅需2小時，檢測效率高，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于分子生物學及生物醫學技術領域，具體涉及一種基于miR-1205的幽門螺旋桿菌陽性胃癌檢測試劑盒及其應用。

背景技術

胃癌(Gastric cancer)是影響人們健康的重大疾病，近年來隨著科學研究深入及醫療水平提升，其發病率雖有所下降，但其在腫瘤死亡病例中仍位居第二。胃癌起源于胃黏膜上皮細胞，其發生發展是一個多因素、多水平、多階段的過程，很多危險因素參與其中，如飲食因素、環境因素及遺傳因素。研究顯示，幽門螺旋桿菌(H.pylori)感染與胃癌的發生發展密切相關。H.pylori是革蘭氏陰性微需氧的細菌，生存于胃部及十二指腸的各區域內。H.pylori感染會引起胃黏膜的慢性炎癥，甚至導致胃及十二指腸潰瘍與胃癌的發生，已經被世界衛生組織(WHO)列為胃癌的I類危險因子。

大樣本的長期隨訪研究證實，胃癌患者在接受H.pylori根治后的預后結果要顯著好于不根治的患者。因此，胃癌是否伴有H.pylori感染影響患者臨床治療方案的制定。目前H.pylori的常見檢測方法包括尿素呼氣試驗(UBT)、糞便Hp抗原檢測(SAT)、抗H.pyloriIgG抗體的血清學試驗和細菌學培養。胃鏡下的組織病理活檢是檢測胃癌的金標準，如果能夠在確定胃癌時同時檢測H.pylori感染，能夠及時為患者設計治療方案并縮短治療時間。顯然，目前H.pylori的檢測方法很難辦到。例如，患者胃出血會造成UBT的假陰性結果，血清學試驗由于其抗體效價能維持很長時間無法區分過去和現在的H.pylori感染，體外培養H.pylori既費時又費力，SAT結果的準確性受多種因素，如抗菌藥物和上消化道出血的影響。

微小RNA(microRNAs)是一種長度為22-28個核苷酸的RNA分子，廣泛存在于真核生物中。研究顯示，H.pylori感染能夠影響microRNAs的表達。有鑒于上述現有的H.pylori檢測技術中存在的缺陷，本發明人基于microRNAs設計了一種胃癌組織幽門螺旋桿菌檢測試劑盒及其應用方法，通過常規熒光定量PCR檢測手段，達到準確、快速檢測幽門螺旋桿菌的目的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基于miR-1205的幽門螺旋桿菌陽性胃癌檢測試劑盒及其應用，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種基于miR-1205的幽門螺旋桿菌陽性胃癌檢測試劑盒，包括miR-1205的特異性引物、人源U6基因的特異性引物，其中

所述miR-1205的特異性引物的序列如下：

SEQ ID NO.5：5′-CACGCATCTGCAGGGTTT-3′，

SEQ ID NO.6：5′-CCAGTGCAGGGTCCGAGGTA-3′；

所述人源U6基因的特異性引物的序列如下：

SEQ ID NO.7：5′-GCGCGTCGTGAAGCGTTC-3′，

SEQ ID NO.8：5′-GTGCAGGGTCCGAGGT-3′。

優選的是，所述miR-1205的核苷酸序列為5′-TCTGCAGGGTTTGCTTTGAG-3′。