[發明專利]異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母及其構建方法有效
| 申請號: | 202111364221.3 | 申請日: | 2021-11-17 |
| 公開(公告)號: | CN114150012B | 公開(公告)日: | 2023-03-21 |
| 發明(設計)人: | 盧文玉;張傳波;葉楠;田錦平 | 申請(專利權)人: | 天津大學 |
| 主分類號: | C12N15/81 | 分類號: | C12N15/81;C12N1/19;C12N15/54;C12N15/56;C12N15/61;C12P33/20;C12R1/865 |
| 代理公司: | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人: | 陸藝 |
| 地址: | 300350 天津市津南區海*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 合成 人參 皂苷 f2 重組 釀酒 酵母 及其 構建 方法 | ||
1.異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母的構建方法,其特征是包括如下步驟:
敲除第一種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母的二酰基甘油酰基轉移酶DGA1基因并過表達二酰甘油激酶DGK1基因,得到第二種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母;
所述二酰基甘油酰基轉移酶DGA1基因的核苷酸序列以SEQ ID NO.3所示;
所述二酰甘油激酶DGK1基因的核苷酸序列以SEQ ID NO.4所示;
所述第一種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母用下述步驟構建:將優化后的糖基轉移酶GTK1基因和優化后的糖基轉移酶UGT1基因轉入生產原人參二醇PPD的釀酒酵母,得到第一種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母;
所述優化后的糖基轉移酶GTK1基因的核苷酸序列以SEQ ID NO.1所示;
所述優化后糖基轉移酶UGT1基因的核苷酸序列以SEQ ID NO.2所示。
2.異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母的構建方法,其特征是包括如下步驟:
敲除權利要求1所述的第二種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母的β-葡萄糖水解酶EGH1基因,過表達磷酸葡萄糖變位酶PGM1基因和UDP葡萄糖焦磷酸化酶UGP1基因,得到第三種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母;
所述β-葡萄糖水解酶EGH1基因的核苷酸序列以SEQ ID NO.5所示;
所述磷酸葡萄糖變位酶PGM1基因的核苷酸序列以SEQ ID NO.6所示;
所述UDP葡萄糖焦磷酸化酶UGP1基因的核苷酸序列以SEQ ID NO.7所示。
3.權利要求1的異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母的構建方法構建的第二種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母。
4.權利要求2的異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母的構建方法構建的第三種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母。
5.權利要求3的第二種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母發酵生產人參皂苷F2的應用。
6.權利要求4的第三種異源合成人參皂苷F2的重組釀酒酵母發酵生產人參皂苷F2的應用。
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