[發明專利]用于檢測多種呼吸道病毒的組合物及其試劑盒和應用

有效

• 申請號: 202111362220.5
• 申請日: 2021-11-17
• 公開（公告）號: CN113981147B
• 公開（公告）日: 2023-08-01
• 發明（設計）人: 袁子國;王艷云;袁浩;張秀香;楊子鵬;張翩
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 陳歡

1.用于檢測多種呼吸道病毒的組合物，其特征在于，包括以下1)-8)所示的核酸序列組合：

1)如SEQ?ID?NO:1所示的鼻病毒上游引物、如SEQ?ID?NO:2所示的鼻病毒下游引物，和如SEQ?ID?NO:3所示的鼻病毒探針；

2)如SEQ?ID?NO:4所示的豬流行性腹瀉病毒上游引物、如SEQ?ID?NO:5所示的豬流行性腹瀉病毒下游引物，和如SEQ?ID?NO:6所示的豬流行性腹瀉病毒探針；

3)如SEQ?ID?NO:7所示的乙型流感病毒上游引物、如SEQ?ID?NO:8所示的乙型流感病毒下游引物，和如SEQ?ID?NO:9所示的乙型流感病毒探針；

4)如SEQ?ID?NO:10所示的腺病毒上游引物、如SEQ?ID?NO:11所示的腺病毒下游引物，和如SEQ?ID?NO:12所示的腺病毒探針；

5)如SEQ?ID?NO:13所示的副流感病毒上游引物、如SEQ?ID?NO:14所示的副流感病毒下游引物，和如SEQ?ID?NO:15所示的副流感病毒探針；

6)如SEQ?ID?NO:16所示的新型冠狀病毒上游引物、如SEQ?ID?NO:17所示的新型冠狀病毒下游引物，和如SEQ?ID?NO:18所示的新型冠狀病毒探針；

7)如SEQ?ID?NO:19所示的呼吸道合胞病毒上游引物、如SEQ?ID?NO:20所示的呼吸道合胞病毒下游引物，和如SEQ?ID?NO:21所示的呼吸道合胞病毒探針；

8)如SEQ?ID?NO:22所示的豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒上游引物、如SEQ?ID?NO:23所示的豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒下游引物，和如SEQ?ID?NO:24所示的豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒探針。

2.如權利要求1所述的用于檢測多種呼吸道病毒的組合物，其特征在于，所述用于檢測多種呼吸道病毒的組合物包括組合物1和組合物2，所述組合物1包括權利要求1中1)-4)所示的核酸序列組合，所述組合物2包括權利要求1中5)-8)所示的核酸序列組合。

3.如權利要求2所述的用于檢測多種呼吸道病毒的組合物，其特征在于，組合物1中1)-4)所示的核酸序列組合，所述探針的5’端包含有熒光報告基團，所述熒光報告基團彼此互不相同且互不干擾，選自FAM、HEX、NED、ROX、TET、JOE、TAMRA、CY3、CY5、Texas?red中的任意一種。

4.如權利要求2所述的用于檢測多種呼吸道病毒的組合物，其特征在于，組合物2中5)-8)所示的核酸序列組合，所述探針的5’端包含有熒光報告基團，所述熒光報告基團彼此互不相同且互不干擾，選自FAM、HEX、NED、ROX、TET、JOE、TAMRA、CY3、CY5、Texas?red中的任意一種。

5.用于檢測多種呼吸道病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權利要求1-4中任一項所述的用于檢測多種呼吸道病毒的組合物。

6.如權利要求5所述的用于檢測多種呼吸道病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的反應體系包括：50～500nM的PCR引物、50～250nM的探針。

7.如權利要求5所述的用于檢測多種呼吸道病毒的試劑盒，其特征在于，所述組合物中組合物1的最低檢出量可低至2.7copies/μL，組合物2的最低檢出量可低至2.5copies/μL。

8.如權利要求5所述的用于檢測多種呼吸道病毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒可特異性檢測鑒定鼻病毒、豬流行性腹瀉病毒、乙型流感病毒、腺病毒、人類呼吸道合胞病毒、新型冠狀病毒、副流感病毒、豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒中的一種或多種，不能檢測出腮腺炎病毒、風疹病毒、人偏肺病毒、麻疹病毒中的一種或多種。

9.如權利要求1所述的用于檢測多種呼吸道病毒的組合物在制備檢測呼吸道病毒試劑盒中的應用。