[發明專利]可視化檢測基因表達的試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202111355337.0
• 申請日: 2021-11-16
• 公開（公告）號: CN116135978A
• 公開（公告）日: 2023-05-19
• 發明（設計）人: 譚華榮;劉翔;張集慧;李月;李金娥
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C12N15/76
• 分類號: C12N15/76;C12N15/90;C12N15/65;C12N15/54;C12Q1/6897
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 喬獻麗;張瑩

1.用于檢測基因表達的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括載體，所述載體上連接有報告基因，所述報告基因選自AHL合酶基因，所述AHL合酶基因選自紫色色桿菌CV31532中的cviI、紫色色桿菌CV12472中的cviI-12472、銅綠假單胞菌中的lasI、銅綠假單胞菌中的rhlI、費氏弧菌中的luxI或豌豆根瘤菌中的rhiI。

2.根據權利要求1所述的用于檢測基因表達的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括AHL檢測菌，所述AHL檢測菌選自紫色色桿菌CV026、紫色色桿菌ΔcviI-12472、大腸桿菌報告菌株EJ532-4和根癌農桿菌NT1。

3.根據權利要求1或2所述的用于檢測基因表達的試劑盒，其特征在于，所述載體上還包括抗性基因，所述抗性基因選自卡那霉素抗性基因kanR、潮霉素抗性基因hygR和安普霉素抗性基因aprR。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的用于檢測基因表達的試劑盒，其特征在于，所述載體上還包括啟動子，優選地，所述啟動子選自組成型啟動子例如P_hrdB,P_ermE*和P_kasO*，以及目的基因啟動子例如P_ovmOI或P_ang1。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的用于檢測基因表達的試劑盒，其特征在于，所述載體選自pIJ10500整合型質粒、pIJ10500K整合型質粒、pSET152整合型質粒和pKC1139游離型質粒。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的用于檢測基因表達的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒適用于不產生AHL的細菌、真菌和動物、植物，優選地，所述試劑盒適用于鏈霉菌。

7.根據權利要求6所述的用于檢測基因表達的試劑盒，其特征在于，所述鏈霉菌選自圈卷產色鏈霉菌7100、龍勝鏈霉菌CGMCC?4.1101、維吉尼亞鏈霉菌CGMCC?4.1530、委內瑞拉鏈霉菌ATCC?10712、天藍色鏈霉菌A3(2)、變鉛青鏈霉菌TK23和灰色鏈霉菌IFO?13350，任選地，所述鏈霉菌的培養基選自MS、MYM、TSB和YEME。

8.根據權利要求1-7中任一項所述的用于檢測基因表達的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒采用的檢測方法選自雙層平板法、瓊脂塊法、牛津杯法、共培養法和大腸桿菌報告菌株快速檢測法。

9.根據權利要求1-8中任一項所述的用于檢測基因表達的試劑盒在基因表達調控關系研究和隱性基因簇激活篩選中的應用或在篩選目的基因簇高表達菌株中的應用。