[發明專利]一種沙眼衣原體抗原檢測用增強液及其應用

有效

• 申請號: 202111344974.8
• 申請日: 2021-11-15
• 公開（公告）號: CN113791214B
• 公開（公告）日: 2022-02-22
• 發明（設計）人: 張樹文;劉光明;丁繼英
• 申請（專利權）人: 南京黎明生物制品有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/548
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• 代理人: 暫無信息

本申請屬于免疫檢測技術領域，具體涉及一種沙眼衣原體抗原檢測用增強液及其應用，沙眼衣原體抗原檢測用增強液包括增強液A和增強液B，所述增強液A為草酸鈦鉀和表面活性劑的混合溶液；所述增強液B為銀離子溶液。本申請的增強液A中的表面活性劑具有增溶、潤濕、乳化和去垢等作用，可消除試劑條背景不干凈的情況，避免影響檢測結果的觀察，同時通過增強液A的還原性將增強液B中的銀離子還原成銀顆粒，將“膠體金*抗體?抗原?抗體（固定于膜上）的夾心復合物”變成“銀顆粒?膠體金*抗體?抗原?抗體（固定于膜上）的夾心復合物”，增加試劑條的靈敏度，操作簡單、不需要改變傳統的生產工藝，不需要借助儀器依然能提高試劑條的靈敏度。

技術領域

本申請屬于免疫檢測技術領域，具體涉及一種沙眼衣原體抗原檢測用增強液及其應用。

背景技術

體外診斷試劑在臨床檢測中應用很廣，其示蹤物有很多種：膠體金、乳膠顆粒、熒光微球、熒光素、時間分辨微球、磁顆粒等等。其中膠體金應用較廣。

膠體金試劑的主要原理是：將特異性抗體固定于硝酸纖維素膜上檢測區，在樣品區滴加樣品后，借助毛細作用，樣品泳動至玻璃纖維膜、膠體金結合墊，樣品液會將結合墊中的金標復合物溶解，并與樣品進行抗原抗體反應，形成抗原-標記抗體-膠體金顆粒的復合物，繼續泳動至硝酸纖維素膜的檢測區，帶有金標記的復合物被檢測區抗原捕獲，形成捕獲抗體-抗原-標記抗體-膠體金顆粒的復合物，呈現紅色條帶。如樣品中沒有待測抗原，則不發生結合，即不顯色。在硝酸纖維素膜檢測區附近一般再固定上針對金標結合物相應的抗體作為質控帶，無論樣品中有無待測物，質控線都應顯示，如無，則檢測失敗。整個過程一般在10-30分鐘內完成，操作簡單、快速，且不需任何儀器。

為了提高膠體金方法的靈敏度，日本富士集團基于膠體金方法，通過銀放大技術提高感光度和特異性的技術來進行照相顯影，簡而言之，就是在“捕獲抗體-抗原-標記抗體-膠體金顆粒的復合物”基礎上通過銀顆粒聚集在金顆粒附近，放大復合物的尺寸，使檢測線條帶更清晰，從而提高膠體金檢測靈敏度。但該技術改變了試劑條的傳統構造，新添了增強液的加樣孔和吸水紙，提高了生產的復雜度和試劑的成本，無法采用傳統生產線進行生產。而且，該技術雖然提高了檢測靈敏度，但是需要借助于機器進行檢測操作，檢測條件要求高，提高了檢測成本，不便于臨床大規模檢測。不僅如此，該技術在銀擴增后存在背景不干凈的現象，影響檢測結果的觀察。

除了日本富士集團之外，英國立明的衣原體快速檢測試劑盒（免疫層析法）操作簡單，保持了傳統生產工藝，生產成本低，但靈敏度有待提高。

發明內容

為了解決目前日本富士的檢測試劑盒背景不干凈、操作復雜，以及英國立明的檢測試劑盒靈敏度不夠的問題，本申請公開了一種沙眼衣原體抗原檢測用增強液及其應用，增強液A為草酸鈦鉀和表面活性劑的混合溶液，其中的表面活性劑具有增溶、潤濕、乳化和去垢等作用，可幫助消除試劑條背景不干凈的情況，避免影響檢測結果的觀察，同時通過增強液A的還原性將增強液B中的銀離子還原成銀顆粒，將“膠體金*抗體-抗原-抗體（固定于膜上）的夾心復合物”變成“銀顆粒-膠體金*抗體-抗原-抗體（固定于膜上）的夾心復合物”，增加試劑條的靈敏度，在原有試劑條的基礎上增加增強液，操作簡單、不需要改變傳統的生產工藝，不需要借助儀器依然能提高試劑條的靈敏度。

第一方面，本申請提供一種沙眼衣原體抗原檢測用增強液，采用如下的技術方案：

一種沙眼衣原體抗原檢測用增強液，包括增強液A和增強液B，所述增強液A為草酸鈦鉀和表面活性劑的混合溶液；所述增強液B為銀離子溶液。

具有還原性的增強液A，將增強液B液中游離的銀離子還原成銀顆粒，通過將“膠體金*抗體-抗原-抗體（固定于膜上）的夾心復合物”變成“銀顆粒-膠體金*抗體-抗原-抗體（固定于膜上）的夾心復合物”，有效的增加了試劑條的靈敏度。

作為優選，上述增強液A中草酸鈦鉀的質量百分比濃度為2-3%，表面活性劑的質量百分比濃度為2-10%；所述增強液B為5-15 μmol/L的硝酸銀溶液。