[發明專利]一種用于原位組織染色脫色的芯片裝置及使用方法

在審

• 申請號: 202111336698.0
• 申請日: 2021-11-12
• 公開（公告）號: CN114088501A
• 公開（公告）日: 2022-02-25
• 發明（設計）人: 吳麗;蘇雪;賀月;楊馬駿;秦玉嶺
• 申請（專利權）人: 南通大學
• 主分類號: G01N1/31
• 分類號: G01N1/31;B01L3/00
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 馬玉雯

本發明公開了一種用于原位組織染色脫色的芯片裝置，包括疊放在一起并相互密封的三層結構，由上至下分別為頂蓋、基板和底板；所述頂蓋上設有一個進液口和一個出液口，頂蓋底面一側凹設形成有凹槽，凹槽兩端與進液口和出液口貫通；所述基板上開設有跟頂蓋底面對應的凹槽作為微流通道；所述微流通道從左往右分為進液區，中心區，組織固定區和出液區；所述底板上有上設有正負電極，電極由電極本體和電極引腳組成；電極本體暴露在微流通道內，正電極的電極本體與進液口相對應；負電極的電極本體位于中心區。本發明的芯片裝置內部操作，避免雜質污染，提高了分析的正確率，電化學手段進行脫色，耗時短，無細胞損傷；具有可視化特點，便于成像分析。

技術領域

本發明涉及一種用于原位組織染色脫色的芯片裝置及使用方法，屬于醫學檢驗分析技術領域。

背景技術

多色免疫組織化學技術(Multiplex Immunohistochemistry,mIHC)是利用免疫學和細胞化學的原理，在同一張切片上同時或先后采用不同顏色的熒光素或酶促產物，來原位示蹤組織或細胞內不同抗原大分子物質的一項多標記染色技術。

多色免疫組織化學技術伴隨著腫瘤精準免疫治療應運而生，可以直接評估腫瘤和腫瘤微環境中多種細胞的表型及它們的空間關系，反映腫瘤微環境的免疫狀態。該技術能更加節省時間且更大程度地利用稀有組織樣本，能幫助研究人員全面、深入和精準地了解腫瘤局部組織和微環境的情況。根據腫瘤微環境中的腫瘤抗原表達和生長特征、浸潤性免疫細胞的數量、表型和功能狀態，以及細胞因子濃度和類型等信息制定一套針對腫瘤局部的個性化免疫治療方案，做到有的放矢。因其可進行高效、精細、準確的測定，該技術已成為腫瘤精準免疫治療的重要手段，具有巨大的臨床應用前景。

多色免疫組織化學技術的要點包括：組織染色和組織脫色。組織染色是指將具有熒光信號的物質和能與組織切片表面蛋白結合的物質結合，并用來標記到組織細胞表面，從而可根據熒光信號對標記的部位進行確認。組織脫色，也就是利用技術將組織細胞表面的標記的染色物質的信號移除。

現有的組織脫色技術，包括光漂白法、酸堿溶液洗脫法、氧化法，在組織脫色的過程中都存在效率低、耗時長、造成細胞表面損傷等缺點。

發明內容

針對上述問題，本發明提出一種用于原位組織染色脫色的芯片裝置及使用方法。該裝置技術可便利的對組織細胞進行熒光染色，并快速、無損的移除組織細胞表面的染色熒光信號。

本發明采用以下技術方案：

一種用于原位組織染色脫色的芯片裝置，包括疊放在一起并相互密封的三層結構，由上至下分別為頂蓋、基板和底板；

所述頂蓋上設有一個進液口和一個出液口，所述進液口上設置了一個進液管；和出液口上設置了一個出液管；頂蓋底面一側凹設形成有凹槽，凹槽兩端與進液口和出液口貫通；

所述基板上開設有跟頂蓋底面對應的凹槽，作為微流通道；

所述微流通道從左往右分為進液區，中心區，組織固定區和出液區；進液區和出液區分別與進液口和出液口相對應，中心區位于微流通道中間位置，組織固定區位于中心區和出液區之間；

所述底板上有上設有正負電極，電極由電極本體和電極引腳組成；電極本體暴露在微流通道內，正電極的電極本體位于進液區與進液口相對應；負電極的電極本體位于中心區；電極引腳均暴露在空氣中，用于外接直流電源。

進一步的，所述頂蓋、基板和底板的材質包括聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、聚碳酸酯(PC)、環烯烴共聚物(COC)或環烯烴聚合物(COP)。

進一步的，所述頂蓋厚度為0.5-2.5毫米。

進一步的，所述基板厚度0.5-2毫米，底板厚度0.5-1.5毫米。

進一步的，所述組織固定區的厚度為0.1毫米。