[發明專利]芽孢桿菌及其防治黃精莖點霉葉斑病的應用和使用方法

有效

• 申請號: 202111311497.5
• 申請日: 2021-11-08
• 公開（公告）號: CN113930364B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 鄒娟;伍賢進;王姝琴;姚傳威;陳梓毅;蔣沅均;劉勝貴
• 申請（專利權）人: 懷化學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P3/00;A01G22/00;A01C1/00;A01G7/06;C12R1/07
• 代理公司: 湖南環創光達知識產權代理有限公司 43264
• 代理人: 宋宇晴

本發明公開了一種芽孢桿菌及其防治黃精莖點霉葉斑病的應用和使用方法，芽孢桿菌（Bacillus?sp.）的保藏編號為：GDMCC?No.62004。本發明的芽孢桿菌通過浸泡黃精根莖或黃精種子的方式可以有效提高黃精莖點霉葉斑病的抵抗效果，且對于黃精莖點霉葉斑病具有很好的治療效果。

技術領域

本發明屬于生物領域，尤其涉及一種芽孢桿菌及其防治黃精莖點霉葉斑病的應用和使用方法。

背景技術

黃精(Polygonatum?sibiricum)又名雞頭黃精、雞頭參、黃花菜、節節高，為百合科黃精屬(Polygonatum)多年生草本植物，藥食兩用，具有提高免疫力、降血脂、降血糖、抗疲勞、抗氧化和抗腫瘤等作用。黃精生長期需3年以上，一般在600～1000m處的海拔生長。2016年國家黃精標準化建設項目落戶湖南懷化洪江市,目前，洪江市現在的黃精林下種植面積萬余公頃，但連續栽培過程中，因林下栽培海拔較低，加上每年6-8月南方雨季，高溫濕熱等因素，造成真菌病害嚴重，影響了黃精的生長。黃精真菌病害的防治主要依賴化學農藥，而大量使用化學農藥，不僅影響黃精的品質，而且會造成黃精農藥殘留超標，影響黃精塊莖的質量和品質。

莖點霉可侵染黃精莖、葉，導致莖葉呈黑色濕腐狀。發病初期，葉面有褐色小斑點，在病原菌侵染一段時間后，遇上雨水常融合成大面積病斑，病斑中央凹陷呈灰白色，植株枯萎。每年6-8月南方雨季，高溫濕熱條件下，易爆發黃精莖點霉葉斑病病害，導致葉片腐爛，植株枯萎，一般發病率在5％-10％之間并且呈逐年擴散趨勢，嚴重時會造成局部絕收。大多數葉斑病為土傳真菌，其菌絲可以產生厚垣孢子越冬，侵入植物組織后很難根除，遇上適宜溫度和濕度，病害會再次發生，目前并未有好的防治效果，以預防為主。目前，對黃精葉斑病的防治，需要在病菌感染之前或剛感染時噴灑多菌靈等化學農藥，而黃精栽培過程中，往往并不知道植株是何時感染病菌的，而等植株出病斑時，病菌已經侵入葉片和莖等組織，則需每月或每逢雨后再次噴灑農藥，以便抑制病斑的擴散和病菌傳播。該種防治方式，不僅成本高，而且大量化學農藥的使用不僅影響了黃精的品質，也造成了大量農藥殘留。因此，開展生物防治黃精真菌病害對黃精產業的可持續發展具有非常重要的作用，應用前景廣闊。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種芽孢桿菌及其防治黃精莖點霉葉斑病的應用和使用方法。本發明的芽孢桿菌通過浸泡黃精根莖或黃精種子的方式可以有效提高黃精莖點霉葉斑病的抵抗效果，且對于黃精莖點霉葉斑病具有很好的治療效果。

為達到上述技術效果，本發明的技術方案是：

一種芽孢桿菌，所述芽孢桿菌(Bacillus?sp.)的保藏編號為：?GDMCC?No.62004。

上述的芽孢桿菌在防治黃精莖點霉葉斑病中的應用，用作防治黃精莖點霉葉斑病的藥物。

一種芽孢桿菌的使用方法，所述包括如下步驟：

步驟一、配置菌體種子液，然后將待種植的黃精根莖或黃精種子浸泡在菌體種子液中2-6h；得到浸泡后的黃精根莖或黃精種子；菌體種子液中包括芽孢桿菌(Bacillussp.)，芽孢桿菌(Bacillus?sp.)?的保藏編號為：GDMCC?No.62004，芽孢桿菌(Bacillussp.)在菌體種子液的菌體濃度不小于5×10⁸CFU/mL；

步驟二、種植浸泡后的黃精根莖或黃精種子，待抽出新苗后，于2-5?天內在新苗上噴灑菌體種子液，噴灑量為0.5-1mL/株。

進一步的改進，所述步驟一中菌體種子液的配置方法如下：

a.菌種活化培養：將芽孢桿菌(Bacillus?sp.)接種于牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基斜面試管中，溫度25℃培養2～5d，得到斜面菌種；

b.將斜面菌種分散到無菌生理鹽水中，得到濃度高于10⁸CFU/mL的種子菌液；