[發(fā)明專利]一類促進豬機體產(chǎn)生非洲豬瘟病毒抗原特異性免疫應(yīng)答的多肽及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111306032.0
• 申請日: 2020-08-26
• 公開（公告）號: CN114315962A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭海學(xué);劉華南;毛箬青;楊帆;孫德惠;周曉麗;朱昱茜;張克山;劉湘濤
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61K39/39;A61K39/12;A61P37/04;A61P31/20
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 張夢澤

本發(fā)明提供了一類促進豬機體產(chǎn)生非洲豬瘟病毒抗原特異性免疫應(yīng)答的多肽及其應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域；所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一種或幾種；所述第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽的氨基酸序列分別如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.5所示。本發(fā)明的多肽能夠顯著促進ASFV致敏免疫細(xì)胞增殖，并且能夠通過促進豬CD8⁺T細(xì)胞分泌IFN?γ促進豬機體產(chǎn)生ASFV抗原特異性免疫應(yīng)答。免疫動物后，能顯著促進豬機體免疫應(yīng)答。本發(fā)明所述多肽或者由多肽聚合得到的多肽聚合物能夠用于制備非洲豬瘟病毒的亞單位疫苗。

本申請是申請日為2020年08月26日、申請?zhí)枮镃N202010871925.9、發(fā)明名稱為《一類促進豬機體產(chǎn)生非洲豬瘟病毒抗原特異性免疫應(yīng)答的多肽及其應(yīng)用》的分案申請。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一類促進豬機體產(chǎn)生非洲豬瘟病毒抗原特異性免疫應(yīng)答的多肽及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

非洲豬瘟(African Swine fever，ASF)是由非洲豬瘟病毒(African Swine fevervirus，ASFV)感染家豬和各種野豬(如非洲野豬、歐洲野豬等)而引起的一種急性、出血性、烈性傳染病。非洲豬瘟病毒主要感染巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞，感染后ASFV通過不同機制逃逸宿主先天和固有的免疫防御系統(tǒng)，如Ⅰ型干擾素(IFN)應(yīng)答、細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)及特異靶基因的活化。

疫苗是預(yù)防非洲豬瘟最有效的方法之一。傳統(tǒng)的減毒活疫苗和滅活疫苗是目前最為常用的疫苗。但是ASFV的天然致弱毒株或基因缺失致弱毒株因存在生物安全隱患、免疫副反應(yīng)、散毒危險及遺傳背景不清等諸多缺陷限制了其在疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用。ASFV編碼多達167種蛋白，這對篩選能誘導(dǎo)機體免疫保護的候選抗原造成極大難度。然而，已報道數(shù)種蛋白可作為病毒中和的靶子，并對其進行了重組蛋白疫苗研究。P30和p54兩種蛋白位于病毒外部，分別涉及病毒吸附和內(nèi)化作用。用p30和p54蛋白免疫家豬可誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體，但不能抵御致死性攻毒，病程亦未改變，而用p30和p54聯(lián)合疫苗免疫既可產(chǎn)生中和抗體，也可改善病程。Inovoa等評估了模擬病毒蛋白的46種肽以確定其建立保護免疫應(yīng)答的能力。接種某些聯(lián)合肽可延遲家豬死亡。但是目前為止，尚未見報道完全有效的ASFV亞單位疫苗。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一類促進豬機體產(chǎn)生非洲豬瘟病毒抗原特異性免疫應(yīng)答的多肽及其應(yīng)用，本發(fā)明的多肽能夠用于制備ASFV亞單位疫苗，制備得到的亞單位疫苗能夠有效增強機體ASFV特異性免疫應(yīng)答，預(yù)防非洲豬瘟病毒感染。

為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一類促進豬機體產(chǎn)生非洲豬瘟病毒抗原特異性免疫應(yīng)答的多肽；所述多肽包括第一多肽、第二多肽、第三多肽、第四多肽和第五多肽中的一種或幾種；

所述第一多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述第二多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述第三多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述第四多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；

所述第五多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；

所述多肽通過促進豬機體中的CD8⁺T細(xì)胞分泌IFN-γ來促進豬機體產(chǎn)生非洲豬瘟病毒抗原特異性免疫應(yīng)答；和/或，

所述多肽通過促進非洲豬瘟病毒抗原特異性單核巨噬細(xì)胞增殖來促進豬機體產(chǎn)生非洲豬瘟病毒抗原特異性免疫應(yīng)答。

優(yōu)選的，所述ASFV抗原特異性單核巨噬細(xì)胞包括CD4⁺T淋巴細(xì)胞、CD8⁺T淋巴細(xì)胞和B細(xì)胞的增殖。