[發明專利]一種銅離子應答蛋白脫水蛋白NtDHN17及其應用

有效

• 申請號: 202111289231.5
• 申請日: 2021-11-02
• 公開（公告）號: CN113943358B
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 代瑾然;沈李柔;陳穗云
• 申請（專利權）人: 云南大學
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C12N15/29;C12N15/84;C12N15/70;A01H5/00;A01H6/82;C12N1/21;C12N15/11;C12R1/19
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 薛紅凡

1.一種銅離子應答蛋白脫水蛋白NtDHN17或編碼所述銅離子應答蛋白脫水蛋白NtDHN17的基因NtDhn17在提高原核生物和/或植物對環境中銅離子耐受性中的應用，所述脫水蛋白NtDHN17的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示；所述基因NtDhn17的核苷酸序列如SEQID?NO:2所示。

2.根據權利要求1所述應用，其特征在于，所述環境中銅離子為10~500mM?。

3.一種提高原核生物和/或植物對銅離子耐受性的方法，其特征在于，上調原核生物或植物中權利要求1所述應用中脫水蛋白NtDHN17或所述基因NtDhn17的表達量。

4.根據權利要求3所述方法，其特征在于，所述上調植物或原核生物中權利要求1所述應用中脫水蛋白NtDHN17或所述基因NtDhn17的表達量的方法，包括以下步驟：

1）構建含權利要求1所述應用中基因NtDhn17的過表達載體或異源表達載體；

2）將步驟1）中構建的含基因NtDhn17的過表達載體或異源表達載體轉入植物或原核生物中，獲得過表達NtDhn17基因的轉基因植物或轉基因原核生物。

5.根據權利要求4所述方法，其特征在于，步驟1）中當提高植物對銅離子耐受性時，所述過表達載體的骨架載體包括植物雙元載體pCanG；

當提高原核生物對銅離子耐受性時，所述原核異源表達載體的骨架載體包括pET28a。

6.根據權利要求5所述方法，其特征在于，步驟1）中所述基因NtDhn17插入pCanG的位置為XbaI和SacI；

所述基因NtDhn17插入pET28a的位置為NheI和SacI。

7.根據權利要求6所述方法，其特征在于，步驟3）中在轉入植物或原核生物后，還包括對轉基因植物或轉基因原核生物進行篩選。

8.根據權利要求7所述方法，其特征在于，所述篩選是采用PCR擴增所述基因；

當針對原核生物時，用于PCR擴增所述基因NtDhn17的引物包括核苷酸序列如SEQ?IDNO:11所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ?ID?NO:12所示的反向引物；

當針對植物時，用于PCR擴增所述基因NtDhn17的引物包括核苷酸序列如SEQ?ID?NO:13所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ?ID?NO:14所示的反向引物。