[發明專利]一種西他列汀中間體的生物合成方法

有效

• 申請號: 202111277892.6
• 申請日: 2021-10-30
• 公開（公告）號: CN113801903B
• 公開（公告）日: 2023-08-15
• 發明（設計）人: 程加銘;盧文才;汪東海;顧學新;胡建濤;張錦濤
• 申請（專利權）人: 江蘇八巨藥業有限公司
• 主分類號: C12P17/18
• 分類號: C12P17/18
• 代理公司: 臺州市方信知識產權代理有限公司 33263
• 代理人: 郭斌斌

1.一種西他列汀中間體的生物合成方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

在無機堿存在下，在非水溶性溶劑中使式Ⅱ化合物4-(2,4,5-三氟苯基)-5-氧代丁酸與式Ⅲ化合物3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪或其鹽酸鹽在輔酶和催化量的酰胺合酶的催化作用下并控制溫度在35℃～45℃下進行酶催化反應，所述酶催化反應的過程中控制反應體系的pH值為8.0～8.5，所述輔酶選自NAD⁺或NADP⁺，得到產物式Ⅰ化合物西他列汀中間體：

所述酰胺合酶的蛋白序列如SEQ?ID?NO.1所示。

2.根據權利要求1所述西他列汀中間體的生物合成方法，其特征在于，所述酰胺合酶的加入量為80g/L～100g/L。

3.根據權利要求1或2所述西他列汀中間體的生物合成方法，其特征在于，所述無機堿選自氫氧化鈉或氫氧化鉀。

4.根據權利要求1或2所述西他列汀中間體的生物合成方法，其特征在于，所述非水溶性溶劑選自乙酸乙酯、二甲基叔丁基醚、二氯甲烷和氯仿中的一種或幾種。

5.根據權利要求1或2所述西他列汀中間體的生物合成方法，其特征在于，所述式Ⅲ化合物3-(三氟甲基)-5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪或其鹽酸鹽與式Ⅱ化合物4-(2,4,5-三氟苯基)-5-氧代丁酸的摩爾比為1：1.0～1.25。