[發(fā)明專利]激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因及其編碼蛋白和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111277333.5
• 申請日: 2021-10-29
• 公開（公告）號: CN113999317B
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王春鳳;楊桂連;陳曉雷;楊文濤;牛天明;石春衛(wèi);包軍付;李楠;王丹;江雨鑫;王紅;谷巍;單寶龍
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/74;C12N1/21;A23K10/18;A23K20/147;A23K20/153;A61K39/12;A61P31/20;C12R1/25
• 代理公司: 濟南圣達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 孫維傲

1.一種激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因，所述融合基因為P12-DNBLK-Ubb-P30，其序列為SEQ ID NO：6中所示的核苷酸序列；或所述融合基因為F△D3-TCC-P12-DNBLK-Ubb-P30，其序列為SEQ ID NO：10中所示的核苷酸序列。

2.權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因編碼的蛋白，其氨基酸序列為1）或2）中所示的序列：

1）SEQ ID NO：19中所示的氨基酸序列；

2）SEQ ID NO：20中所示的氨基酸序列。

3.含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的表達載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的表達載體，其特征在于，所述表達載體以409-pgsA’和409ATA為引物。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的表達載體，其特征在于，所述表達載體以pSIP409-pgsA’-P12-DNBLK-Ubb-P30或pSIP409-pgsA’-F△D3-TCC-P12-DNBLK-Ubb-P30為框架質(zhì)粒。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的表達載體，其特征在于，pSIP409-pgsA’-P12-DNBLK-Ubb-P30或pSIP409-pgsA’-F△D3-TCC-P12-DNBLK-Ubb-P30的框架序列分別如SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：13中所示。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的表達載體，其特征在于，所述表達載體具有asd-alr無抗篩選標(biāo)記。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的表達載體，其特征在于，所述asd-alr無抗篩選標(biāo)記序列如SEQ ID NO：12中所示。

9.含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系。

10.含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的工程菌。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的工程菌，其特征在于，所述工程菌的出發(fā)菌株為植物乳桿菌。

12.根據(jù)權(quán)利要求10所述含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的工程菌，其特征在于，所述工程菌的出發(fā)菌株為植物乳桿菌WCFS1。

13.根據(jù)權(quán)利要求10所述含有權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的工程菌，其特征在于，所述工程菌的出發(fā)菌株為丙氨酸消旋酶基因(alr)缺陷型植物乳桿菌WCFS1/△alr。

14.藥物組合物或藥物制劑或飼料，其包含權(quán)利要求2中所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因編碼的蛋白或權(quán)利要求10-13中任一項所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的工程菌。

15.一種表達權(quán)利要求2所述激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因編碼的蛋白的方法，其包括：構(gòu)建含有權(quán)利要求1所述的融合基因的表達載體，再將構(gòu)建的表達載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞獲得重組菌株，培養(yǎng)該重組菌株，最后從培養(yǎng)物中分離出融合蛋白。

16.權(quán)利要求1所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因或權(quán)利要求2中所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因編碼的蛋白或權(quán)利要求10-13中任一項所述的激發(fā)機體抗非洲豬瘟感染的融合基因的工程菌在制備預(yù)防和/或治療非洲豬瘟的疫苗或藥物或飼料中的應(yīng)用。