[發(fā)明專利]一種應用vismodegib使鼠類多生牙的方法

有效

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• 申請日: 2021-10-28
• 公開（公告）號: CN114009397B
• 公開（公告）日: 2023-02-07
• 發(fā)明（設計）人: 茅傳青;陳偉輝;賴永圳;王承勇;盧萌;蔡志宇
• 申請（專利權）人: 福建醫(yī)科大學附屬協(xié)和醫(yī)院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A61D7/00
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 林瑾

本發(fā)明屬于牙科領域，尤其涉及鼠類多生牙的研究。一種應用vismodegib使鼠類多生牙的方法，其特征是,將鼠類雌雄于發(fā)情期合籠，次日檢測雌鼠，如見雌鼠有陰栓，則定為E0.5天，并將其與雄性鼠類分開飼養(yǎng)，在雌性孕鼠懷孕天數(shù)至E15.0?17.0天，將vismodegib通過單次灌胃給藥的方式進入孕鼠體內。本發(fā)明創(chuàng)造性地將治療腫瘤的Vismodegib用于鼠類多生牙研究，通過灌胃的方式給予孕鼠vismodegib，誘導小鼠第二牙列發(fā)育、萌出產生穩(wěn)定的舌側多生牙表型。經誘導的小鼠可以自然生長、牙齒自行萌出至成年，尚未發(fā)現(xiàn)其他的身體畸形。所建立小鼠多生牙的模型，周期短，經濟成本低，可重復性強。

技術領域

本發(fā)明屬于牙科領域，尤其涉及鼠類多生牙的研究。

背景技術

本發(fā)明所述的多生牙是指多于現(xiàn)有牙齒數(shù)目的牙齒，研究認為多生牙形成可能是挽救了退化的牙齒或者是誘導含有成牙上皮能力的干細胞發(fā)育而成。

目前人類治療牙齒缺失的辦法有：可摘義齒、固定義齒或者是種植義齒等，但是這些修復義齒仍然與天然牙之間存在著明顯差異，因此如果能通過牙齒再生來治療牙齒缺失，無疑是人類的福音。牙齒再生研究者甚多，暫無結果。目前現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)通過轉基因手段誘發(fā)小鼠的殘余連續(xù)性牙板持續(xù)高表達Wnt信號通路可以誘發(fā)局部上皮進一步發(fā)育形成牙齒樣的結構(Popa E,Buchtova M,Tucker A.Revitalising the rudimentaryreplacement dentition in the mouse.Development(Cambridge,England).2019；146(3). https://doi.org10.1242/dev.171363.)如圖1箭頭所示，為通過轉基因手段誘導小鼠殘余連續(xù)性牙板上皮增殖發(fā)育形成牙蕾樣的結構組織，但是文章中報道其并未觀察到牙齒自然萌出，說明了殘余連續(xù)性牙板具有誘導成牙的潛能。

不同物種牙齒的再生能力不同，多牙列動物具有無限的牙齒再生能力，雙牙列物種具有有限的牙齒再生能力，人類是雙牙列，其牙齒具有有限的再生能力。人們將第一副牙列稱為乳牙，第二副牙列稱為恒牙，而第三牙列則是指多于第二牙列的牙齒。研究發(fā)現(xiàn)第一牙列起源于牙板上皮，而第二牙列的發(fā)育起源于連續(xù)性牙板上皮，其中連續(xù)性牙板上皮是一種位于第一牙列舌側的牙板上皮結構。人們發(fā)現(xiàn)無論是牙板上皮還是連續(xù)性牙板均含有牙源性上皮的干細胞。通過對小鼠第一牙列的研究，人們發(fā)現(xiàn)小鼠也存在著類似的連續(xù)性牙板結構。

發(fā)明內容

牙再生是治療牙齒缺失的最佳辦法，本發(fā)明的目的在于通過研究多生牙發(fā)育機制有望進一步實現(xiàn)牙再生的夢想，本發(fā)明提供一種應用vismodegib使鼠類多生牙的方法，以推進牙再生的實現(xiàn)。

本發(fā)明所采用的技術方案為一種應用vismodegib使鼠類多生牙的方法，其特征是, 將鼠類雌雄于發(fā)情期合籠，次日檢測雌鼠，如見雌鼠有陰栓，則定為E0.5天，并將其與雄性鼠類分開飼養(yǎng)，在雌性孕鼠懷孕天數(shù)至E15.0-17.0天，將vismodegib通過單次灌胃給藥的方式進入孕鼠體內。

Vismodegib是一種Hh信號通路抑制劑，目前已經被FDA批準由于臨床治療多種實體腫瘤的藥物，對基底細胞癌、肺癌、胰腺癌、結直腸癌等有療效。研究表明其可以抑制腫瘤細胞的生長，本發(fā)明創(chuàng)造性地將Vismodegib用于鼠類多生牙研究，通過灌胃的方式給予孕鼠vismodegib，可以誘導小鼠第二牙列發(fā)育、萌出產生穩(wěn)定的舌側多生牙表型。

單次灌胃的方式給予孕鼠vismodegib的量為(150mg/kg-200mg/kg)。在150mg/kg可以誘導產生50％以上的舌側多生牙小鼠，而隨著濃度增加我們發(fā)現(xiàn)部分小鼠在E15.5時給予200mg/kg可以誘導小鼠接近100％的舌側多生牙。

所述的鼠類為小鼠。

所述的小鼠為野生型。

雌雄以1:1比例進行合籠。雌雄比例可以為3-1:1，而1:1的比例有助于提高雌鼠的受孕率。