[發明專利]一種含甲基營養型芽孢桿菌的有機活性基質及其制備方法

在審

• 申請號: 202111258277.0
• 申請日: 2021-10-27
• 公開（公告）號: CN113966708A
• 公開（公告）日: 2022-01-25
• 發明（設計）人: 周紅姿;張新建;周方園;張廣志;趙曉燕;謝雪迎;吳曉青;范素素
• 申請（專利權）人: 山東省科學院生態研究所（山東省科學院中日友好生物技術研究中心）
• 主分類號: A01G24/20
• 分類號: A01G24/20;A01G24/22;A01G24/27;A01G22/05;C05G3/00;C05G3/50;C05G3/60
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 侯緒軍

1.一種含甲基營養型芽孢桿菌的有機活性基質，其特征在于，包括甲基營養型芽孢桿菌和蘑菇菌糠發酵物。

2.如權利要求1所述的有機活性基質，其特征在于，所述甲基營養型芽孢桿菌為KNK-1，保藏編號為CGMCC NO.16842，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期為2018年12月11日，分類命名為Bacillus methylotrophicus。

3.如權利要求1所述的有機活性基質，其特征在于，所述有機活性基質中，甲基營養型芽孢桿菌KNK-1的活菌數量≥1.00×10⁸cfu/g。

4.一種制備如權利要求1所述的有機活性基質的方法，具體步驟如下：

(1)將甲基營養型芽孢桿菌KNK-1接種到LB培養液中，30℃下，180rpm/min培養24h，得到種子液；

(2)用不銹鋼發酵罐六連罐對菌株KNK-1進行發酵，發酵培養基為糖蜜培養基，裝液量為發酵罐容量的2/3，接種量為6％，溫度30℃，攪拌速度為300rpm/min，通氣量3L/min，發酵時間2天，得到發酵液；

(3)成品粉劑制備：向步驟(2)制備的發酵液中加入硅藻土吸附菌體后，再加入羧甲基纖維素鈉、聚乙烯醇、吐溫80和黃原膠，混合粉碎后得可濕性粉劑；

(4)畜禽糞便處理：收集新鮮畜禽糞便；

(5)餅肥處理：將花生餅或芝麻餅或豆餅粉碎，過2mm篩子；

(6)將作物秸稈放入粉碎機中進行粉碎，然后與蘑菇菌糠、新鮮畜禽糞便和餅肥于腐熟坑中腐熟，得腐熟物料；

(7)將步驟(6)的腐熟物料與普通育苗基質混合均勻；再加入步驟(3)制成的KNK-1成品粉劑，得到含甲基營養型芽孢桿菌的有機活性基質。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，每1L糖蜜培養基含有以下成分：100mL糖蜜、1g氯化鈉、3g尿素。

6.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)為：向步驟(2)制備的發酵液中加入10％載體硅藻土，每間隔1h攪拌一次，使載體充分吸附菌體；24h后室溫干燥，加入4％羧甲基纖維素鈉、7％聚乙烯醇、3.5％吐溫80和0.5％黃原膠混合，氣流粉碎機粉碎，過325目篩，獲得KNK-1可濕性粉劑，以上百分含量均為質量百分含量，以發酵液重量計。

7.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟(6)為：將作物秸稈粉碎至長度為1～10cm，按比例＝1:1和攤開晾曬后的蘑菇菌糠混勻成混合料，調整水分含量為40％，均勻擺放于1.5-2.0米的腐熟坑中10～20cm，按體積比例30:1加入適量新鮮畜禽糞便和處理后的餅肥，再均勻擺放10～20cm厚的混合料，再加入適量新鮮畜禽糞便和餅肥，如此循環處理，最后表層用泥土覆蓋混合料，發酵30～60天，溫度在30～60℃，中間翻倒3次，發酵完成。

8.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟(7)中，腐熟物料與普通育苗基質的混合比例為質量比1:1。

9.如權利要求1所述的有機活性基質在蔬菜育苗中的應用。