[發明專利]一種蜜環菌狹義種的生產方法

在審

• 申請號: 202111237751.1
• 申請日: 2021-10-22
• 公開（公告）號: CN113951047A
• 公開（公告）日: 2022-01-21
• 發明（設計）人: 張躍進;劉玲;陸博;孫建華;吳娜;李小虎;劉彥鐸
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學;柞水縣科技開發中心;陜西漢王略陽中藥科技有限公司
• 主分類號: A01G18/00
• 分類號: A01G18/00;A01G18/20
• 代理公司: 西安恒泰知識產權代理事務所 61216
• 代理人: 史玫

本發明公開一種蜜環菌狹義種的生產方法，屬于蜜環菌生產技術領域。所述蜜環菌狹義種的生產方法在菌種來源明確的情況下，篩選出低成本且高效的Ⅱ級菌種培養和Ⅲ級菌種培養培養基，其中Ⅱ級菌種培養的培養基配方每升中包含：玉米粉15?25g，酵母粉8?12g，磷酸二氫鉀1?3g，余量為水；Ⅲ級菌種培養的培養基配方按質量百分比計算包括有：櫟木枝條35?45％，馬鈴薯汁55?65％；或櫟木木屑45?55％，棉籽殼25?35％，麩皮15?20％，石膏0.5?1.5％，生石灰0.2?0.7％，蔗糖0.3?0.5％，磷酸二氫鉀0.05?0.15％；其中所述培養基配方中料水比1:1.4kg/L。

技術領域

本發明涉及蜜環菌生產技術領域，尤其涉及一種蜜環菌狹義種的生產方法。

背景技術

蜜環菌隸屬擔子菌亞門(Basidomycotina)，層菌綱(Hymenomycetes)，傘菌目(Agaricales)，口蘑科(Tricholomataceae)，兼性寄生真菌。在全球范圍內，蜜環菌在歐美報道有17種，非洲5種，澳洲5種，亞洲19種，我國分布有15種(王漢臣2010；趙俊2008；2005；2000；孫立夫2003；秦國夫2000；1999；賀偉1996)。

蜜環菌(Armillaria species)是一種藥食兼用菌，也是高度退化的蘭科中藥材天麻(Gastrodia elata Bl.)生長發育的第一營養來源，其質量好壞影響著天麻的品質和產量。目前國內發現的蜜環菌生物種中，并非所有菌種都適合天麻栽培，而蜜環菌的種類影響著天麻的產量和品質。多個研究表明高盧蜜環菌菌索茂密、粗壯，生長迅速，寄生性不強，有利于天麻的栽培生產(Kim HJ 1997；Cha JY 1995a)。不同種類的蜜環菌對天麻產量和天麻素含量都有較大的影響(陳明義2004；孫士青2003；王秋穎2001)。綜合蜜環菌報道來看，與天麻共生的蜜環菌有高盧蜜環菌(長白山，云南昭通，貴州)、頭柄蜜環菌(貴州)、北方蜜環菌、奧氏蜜環菌(日本)、北海道蜜環菌(日本)、芥黃蜜環菌(云南昭通)、單生蜜環菌(日本)、假蜜環菌、A.nabsnona和蜜環菌狹義種(貴州，云南昭通)(黃萬兵2014；彭述敏2011；Sekizaki H 2008；Cha J Y 1995a；1995b)。Guo et al.(2016)認為可用于天麻栽培的蜜環菌分為7個支系，分別為支系1、支系2(CBS O)、支系3(CBS L)、A.nabsnona、Nag.E、頭柄蜜環菌和支系6，其中Nag.E為首次發現可與天麻共生。

由于市場上使用的蜜環菌種類不明，生產方法不當，質量參差不齊，生產中也常遇到蜜環菌菌種變異、退化以及種類使用不當造成天麻產量下降或空窩等問題。因此，建立蜜環菌菌種明確并配套適宜生產方法，是提高天麻產量和質量的可行方法之一。

蜜環菌生產方法包含：Ⅰ級菌種培養；Ⅱ級菌種(原種)培養和Ⅲ級菌種(生產種)培養，詳見陳順方(2009)。但研究發現：不同菌株對不同培養基表現出不同喜好。例如：宋淼等(2012)以葡萄糖、蔗糖、玉米淀粉、可溶性淀粉為碳源，液體培養蜜環菌，發現玉米淀粉為最佳碳源。賀建超等(2018)通過添加葡萄糖、麥芽糊精、紅薯淀粉、馬鈴薯淀粉、可溶性淀粉等碳源培養蜜環菌時發現，最佳碳源為麥芽糊精。彭述敏(2010)對貴州兩株蜜環菌最適的生長條件進行研究發現，葡萄糖為最佳碳源，酵母膏和蛋白胨為最佳氮源，最適無機鹽為KH₂PO₄。而閆軍等(2016)試驗同樣表明培養蜜環菌時，最佳碳源是葡萄糖，最佳氮源是蛋白胨。閆軍、彭述敏試驗表明蛋白胨是蜜環菌最佳氮源；梁艷等(2018)研究發現，培養基中添加牛肉膏時蜜環菌萌發時間最短。而且研究發現，Ⅱ級菌種(原種)培養對Ⅲ級菌種(生產種)培養有顯著影響，例如姜月華等(1996)研究發現液體培養所得二級蜜環菌接種到菌棒或菌枝上比接種固體培養所得二級蜜環菌，培養三級菌種菌材的時間要短。因此，開發成本低、生產效率高，且質量穩定的蜜環菌生產方法是當前亟需解決的問題。

發明內容

本發明概述

本發明的目的是提供一種蜜環菌狹義種的生產方法。