[發明專利]一種輔助懸浮細胞成像的系統及其使用方法和應用

在審

• 申請號: 202111232986.1
• 申請日: 2021-10-22
• 公開（公告）號: CN114002195A
• 公開（公告）日: 2022-02-01
• 發明（設計）人: 李鵬;崔元彬;姚瑤;胡朵
• 申請（專利權）人: 中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院
• 主分類號: G01N21/63
• 分類號: G01N21/63;G01N21/01
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 邊人洲

1.一種輔助懸浮細胞成像的系統，其特征在于，所述系統包括功能化標記的磁性微球、功能化標記表面的細胞載體和磁場發生裝置；

其中，所述磁性微球的功能化標記物和所述細胞載體的功能化標記物具有特異性結合作用。

2.根據權利要求1所述的輔助懸浮細胞成像的系統，其特征在于，所述細胞載體包括培養皿或載玻片。

3.根據權利要求1或2所述的輔助懸浮細胞成像的系統，其特征在于，所述磁性微球的粒徑不超過2μm；

優選地，所述磁性微球表面修飾有功能基團和/或無機顆粒材料；

優選地，所述功能基團包括氨基、羥基或羧基中的任意一種或至少兩種的組合；

優選地，所述無機顆粒材料包括二氧化硅、二氧化鈦、二氧化錳或氧化石墨烯中的任意一種或至少兩種的組合。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的輔助懸浮細胞成像的系統，其特征在于，所述磁性微球被包括生物素、鏈霉親和素、色氨酸、組氨酸或含鎳分子中的任意一種或至少兩種的組合功能化標記，優選為生物素；

優選地，所述生物素的添加質量與磁性微球質量的比例為1:(4-12)。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的輔助懸浮細胞成像的系統，其特征在于，所述細胞載體的表面被包括鏈霉親和素、生物素、色氨酸、組氨酸或含鎳分子中的任意一種或至少兩種的組合功能化標記，優選為鏈霉親和素；

優選地，所述鏈霉親和素的添加質量與所述生物素的添加質量的比例為(3-8):1。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的輔助懸浮細胞成像的系統，其特征在于，所述磁場發生裝置包括磁鐵、電磁場發生器。

7.一種如權利要求1-6中任一項所述的輔助懸浮細胞成像的系統的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括以下步驟：

(1)將功能化標記的磁性微球與懸浮細胞混合，得到標記懸浮細胞；

(2)將步驟(1)中得到的標記懸浮細胞加入到功能化標記表面的細胞載體中，然后靜置于磁場發生裝置中，進行標記懸浮細胞的物理固定；

(3)利用顯微鏡進行懸浮細胞成像。

8.根據權利要求7所述的輔助懸浮細胞成像的系統的使用方法，其特征在于，步驟(1)所述懸浮細胞與功能化標記的磁性微球的數量比為1:(1-20)；

優選地，步驟(1)所述懸浮細胞的來源包括T細胞、B細胞、樹突狀細胞或NK細胞中的任意一種或至少兩種的組合；

優選地，步驟(1)所述混合的時間為20-40min，混合的溫度為4-42℃；

優選地，步驟(2)所述靜置的時間為3-8min，靜置的溫度為4-37℃；

優選地，步驟(3)所述顯微鏡包括激光共聚焦顯微鏡、熒光倒置顯微鏡、全內反式顯微鏡、結構光照明顯微鏡、正置顯微鏡或超分辨光學成像顯微鏡中的任意一種。

9.根據權利要求7或8所述的輔助懸浮細胞成像的系統的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括以下步驟：

(1)將功能化標記的磁性微球與懸浮細胞在4-42℃下混合20-40min，得到標記懸浮細胞；

其中，所述懸浮細胞與功能化標記的磁性微球的數量比為1:(1-20)；

(2)將步驟(1)中得到的標記懸浮細胞加入到功能化標記表面的細胞載體中，然后在磁場發生裝置中于4-37℃下靜置3-8min，進行標記懸浮細胞的固定；

(3)利用顯微鏡進行懸浮細胞成像。

10.一種如權利要求1-6中任一項所述的輔助懸浮細胞成像的系統在懸浮細胞成像中的應用。