[發明專利]一種基于上轉換納米材料“關-開”型熒光傳感器高靈敏檢測甲砜霉素的方法

有效

• 申請號: 202111230217.8
• 申請日: 2021-10-21
• 公開（公告）號: CN113999679B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 牛娜;衣佳琪;陳立鋼
• 申請（專利權）人: 東北林業大學
• 主分類號: C09K11/85
• 分類號: C09K11/85;C09K11/77
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種NaYF₄：Yb，Er-金納米粒子熒光探針的制備方法，其特征在于按以下步驟制備的：

一、制備油酸鹽前驅體：將10mmol～30mmol稀土金屬氯化物、30mmol～90mmol油酸鈉、15mL～45mL蒸餾水、20mL～60mL乙醇和35mL～105mL正己烷的混合溶液加入燒瓶中，磁力攪拌下加熱到70℃保持4h～5h，然后冷卻至室溫，將混合溶液倒入分液漏斗靜置5min～7min，將上層液體用蒸餾水洗滌三次，在80℃～85℃下水浴烘干，得到的固體蠟狀物質為含有Y、Er和Yb元素的油酸鹽前驅體；步驟一中所述的稀土金屬氯化物為YCl₃、ErCl₃和YbCl₃；

二、制備NaYF₄：Yb，Er：將NaF、Y(OA)₃、Yb(OA)₃、Er(OA)₃按照物質量比為1∶0.785∶0.20∶0.15或1∶0.795∶0.20∶0.005與15mL～20mL油酸、15mL～20mL十八烯混合后加入到三口燒瓶中，真空條件下反應40min～60min，溫度為280℃～310℃；反應結束后冷卻至室溫，用乙醇與環己烷交替離心后，分散于10mL環己烷中；

三、NaYF₄：Yb，Er的表面修飾：將步驟二所得油溶性NaYF₄：Yb，Er通過表面修飾轉化為水溶性材料，取2mL步驟二中合成的NaYF₄：Yb，Er分散在20mL蒸餾水中，加入0.1g～0.15g十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)，劇烈攪拌10h～24h，即獲得CTAB修飾的NaYF₄：Yb，Er；

四、制備金納米粒子：在250mL圓底燒瓶中加入500μL～1000μL，40mmol/L～50mmol/L的HAuCl₄和99mL～99.5mL的超純水，在油浴中加熱至沸騰，保持7min～10min，將1.8mL～2mL新配制的檸檬酸鈉水溶液滴加到上述煮沸溶液中，保持10min～15min，溶液由淡黃色變為酒紅色，將該酒紅色溶液在無加熱條件下攪拌10min～15min，冷卻至室溫，得到的金納米粒子，置于冰箱保存；

五、制NaYF₄：Yb，Er-金納米粒子熒光探針：分別量取步驟三中制備的CTAB修飾的NaYF₄：Yb，Er溶液50μL～70μL與步驟四中制備的金納米粒子180μL～200μL溶液，在2.23mL～2.47mLpH＝6的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖溶液孵育10min～15min后，得到NaYF₄：Yb，Er-金納米粒子熒光探針。

2.利用權利要求1所述制備方法制備的NaYF₄：Yb，Er-金納米粒子熒光探針檢測甲砜霉素的方法，其特征在于按以下步驟完成的：

一、甲砜霉素標準溶液的檢測：取0.01μmol/L～1μmol/L不同濃度的甲砜霉素標準溶液500μL與2.5mL NaYF₄：Yb，Er-金納米粒子熒光探針在室溫下孵育10min～15min，使用穩態瞬態熒光光譜儀在980nm的激發波長下，檢測上述不同濃度甲砜霉素加入后溶液的熒光光譜，并記錄在650nm處的熒光強度；

二、雞蛋樣品中甲砜霉素的檢測：將一定量的甲砜霉素添加到10mL～15mL混合均勻的雞蛋液中，超聲溶解，加入10mL～15mL質量分數10％的三氯乙酸處理雞蛋中的蛋白質，超聲15min～30min離心后取澄清液，用1mol/L～2mol/L NaOH溶液500～1000μL調節混合液的pH至5～7，此時甲砜霉素的加標濃度為0.01μmol/L～1μmol/L，按照上述步驟一甲砜霉素標準溶液的檢測方法對加標樣品進行測試。