[發(fā)明專(zhuān)利]咖啡短體線蟲(chóng)Pc-CD蛋白、其編碼基因及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111218472.0
• 申請(qǐng)日: 2021-10-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113912698B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李宇;王珂;夏艷輝;孫炳劍;李洪連;袁虹霞
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C07K14/47
• 分類(lèi)號(hào): C07K14/47;C12N15/12;C12N15/113;C12N15/85;A01K67/033
• 代理公司: 鄭州盈派知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 41196
• 代理人: 樊羿;張曉輝

本發(fā)明涉及一種咖啡短體線蟲(chóng)Pc?CD蛋白、其編碼基因及應(yīng)用，旨在解決咖啡短體線蟲(chóng)難以防治的技術(shù)問(wèn)題。本發(fā)明篩選得到一種Pc?CD蛋白，獲取自咖啡短體線蟲(chóng)，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，編碼該蛋白的Pc?cd基因核苷酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。本發(fā)明利用dsRNA處理沉默Pc?cd基因后，咖啡短體線蟲(chóng)的繁殖力及其對(duì)寄主玉米的致病力與對(duì)照GFP?dsRNA處理組相比均顯著降低，表明此基因在咖啡短體線蟲(chóng)的生殖和侵染致病過(guò)程中具有重要作用，可作為植物抗線蟲(chóng)工程的靶標(biāo)基因；本發(fā)明對(duì)于短體線蟲(chóng)致病機(jī)理研究以及抗線蟲(chóng)植物制備具有重大應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種咖啡短體線蟲(chóng)Pc-CD蛋白、其編碼基因及應(yīng)用。

背景技術(shù)

咖啡短體線蟲(chóng)( Pratylenchus?coffeae)是一種重要的遷移性內(nèi)寄生植物病原線蟲(chóng)，主要通過(guò)口針穿刺寄主根部皮層進(jìn)入根內(nèi)寄生取食，造成植物根系出現(xiàn)壞死、腐爛等癥狀，進(jìn)而導(dǎo)致寄生植物對(duì)水分和營(yíng)養(yǎng)的吸收與運(yùn)輸受阻，該線蟲(chóng)侵染所造成的傷口還為土壤中其它病原物的入侵創(chuàng)造條件，造成復(fù)合侵染現(xiàn)象，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。咖啡短體線蟲(chóng)是危害最為嚴(yán)重的的短體線蟲(chóng)之一，在世界各地普遍發(fā)生，寄主范圍非常廣泛，在我國(guó)嚴(yán)重危害小麥、玉米、大豆、芝麻、煙草、番茄、山藥等多種作物。咖啡短體線蟲(chóng)的廣泛分布和對(duì)農(nóng)業(yè)的巨大危害使其受到越來(lái)越多的關(guān)注和研究，但因其定殖和適生能力強(qiáng)，寄主范圍廣，至今對(duì)該線蟲(chóng)的防治仍是一個(gè)世界性難題，缺少有效的靶標(biāo)和方法。

效應(yīng)蛋白是一類(lèi)由病原物產(chǎn)生的，有助于病原物從寄主獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能夠改變寄主結(jié)構(gòu)細(xì)胞和功能的蛋白質(zhì)或小分子物質(zhì)。植物寄生線蟲(chóng)的效應(yīng)蛋白主要由線蟲(chóng)食道腺細(xì)胞分泌，在線蟲(chóng)侵染致病等過(guò)程中具有重要作用。近年來(lái)，植物寄生線蟲(chóng)效應(yīng)蛋白的篩選和功能逐漸成為研究的熱點(diǎn)，但多數(shù)研究主要集中在定居型寄生的根結(jié)和孢囊線蟲(chóng)上，而在短體線蟲(chóng)這一類(lèi)遷移性寄生線蟲(chóng)上的研究較少見(jiàn)。

因此，挖掘和篩選咖啡短體線蟲(chóng)新的效應(yīng)蛋白，研究其在咖啡短體線蟲(chóng)侵染致病等過(guò)程中的生物學(xué)功能及其與寄主互作的分子機(jī)制，將其作為靶標(biāo)用于抗線蟲(chóng)植物的制備，具有重大的價(jià)值和應(yīng)用前景。

公開(kāi)于該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在加深對(duì)本發(fā)明總體背景技術(shù)的理解，而不應(yīng)當(dāng)被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種來(lái)源于咖啡短體線蟲(chóng)Pc-CD蛋白及其編碼基因，以解決咖啡短體線蟲(chóng)難以防治的技術(shù)問(wèn)題。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明篩選得到一種咖啡短體線蟲(chóng)的Pc-CD蛋白，長(zhǎng)度為481個(gè)氨基酸，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

克隆得到編碼所述咖啡短體線蟲(chóng)Pc-CD蛋白的 pc-cd基因，長(zhǎng)度為1446個(gè)核苷酸，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：2所示。

基于所述咖啡短體線蟲(chóng) Pc-cd基因核苷酸序列設(shè)計(jì)合成原位雜交探針，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:?3所示。

基于所述咖啡短體線蟲(chóng) Pc-cd基因核苷酸序列設(shè)計(jì)合成了一個(gè)dsRNA片段，?其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：4所示。

所述 Pc-cd基因或所述Pc-CD蛋白能夠有效應(yīng)用于咖啡短體線蟲(chóng)的防控中。