[發明專利]一種檢測霜霉威的試紙條及其應用

有效

• 申請號: 202111209541.1
• 申請日: 2021-10-18
• 公開（公告）號: CN113759110B
• 公開（公告）日: 2023-08-08
• 發明（設計）人: 王春瓊;張燕;陳丹;曾彥波;秦世春;李苓;張軻;張曉偉;蔡潔云;孫浩巍;彭麗娟;龍杰;楊藝敏;張慶剛
• 申請（專利權）人: 云南省煙草質量監督檢測站
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/558;G01N33/577
• 代理公司: 成都市鼎宏恒業知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 51248
• 代理人: 陳康

1.一種檢測霜霉威的試紙條，包括樣品吸收墊（1）、結合物釋放墊（2）、反應膜（3）、吸水墊（4）和底板（7），其特征在于：所述反應膜（3）上包被有霜霉威半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線（5）和羊抗鼠抗抗體的質控線（6），所述結合物釋放墊（2）噴涂有霜霉威單克隆抗體-膠體金標記物；

所述霜霉威半抗原的制備方法如下：

取霜霉威1.88g，加吡啶20ml溶解，加1，4-環已烷二異氰酸酯2.49g，加三乙胺1.3ml，加熱80℃反應3h，停止反應，旋蒸，除去吡啶和三乙胺，得到紅色油狀物，加入v/v為1/15的乙醚與正己烷35ml重結晶，得到環己烷異氰酸酯-霜霉威半抗原產物1.13g，收率31.9%；

所述環己烷異氰酸酯-霜霉威半抗原的結構式為：。

2.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述樣品吸收墊（1）、結合物釋放墊（2）、反應膜（3）、吸水墊（4）依次粘貼在底板（7）上。

3.如權利要求1-2任一項所述的試紙條，其特征在于，所述結合物釋放墊（2）1/3~1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。

4.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述霜霉威半抗原-載體蛋白偶聯物由霜霉威半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白或人血清白蛋白中的一種。

5.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述霜霉威單克隆抗體是以霜霉威半抗原-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述羊抗鼠抗抗體是將鼠源抗體免疫羊得到。

6.一種制備權利要求1-5任一項所述試紙條的方法，其包括以下步驟：

（1）制備噴涂有霜霉威單克隆抗體-膠體金標記物的結合物釋放墊；

（2）制備包被有霜霉威半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線的反應膜；

（3）將步驟（1）和步驟（2）制備好的結合物釋放墊、反應膜與樣品吸收墊、吸水墊和底板組裝成試紙條。

7.一種檢測采后待烤煙葉或初烤煙葉中霜霉威殘留的方法，其包括以下步驟：

步驟a、用權利要求1-5任一項所述的試紙條進行檢測；

步驟b、分析檢測結果。