[發(fā)明專利]一種抗烏鱧Nramp抗體的抗原表位多肽及其在抗體制備中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111198976.0
• 申請(qǐng)日: 2021-10-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113683674B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許國(guó)晶;朱永安;孟慶磊;張金路;朱樹(shù)人;吳蒙蒙;王志忠;安麗;鄭慧麗;張龍崗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省淡水漁業(yè)研究院(山東省淡水漁業(yè)監(jiān)測(cè)中心)
• 主分類號(hào): C07K14/46
• 分類號(hào): C07K14/46;C07K16/18;G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 宋海海

本發(fā)明提供一種抗烏鱧Nramp抗體的抗原表位多肽及其在抗體制備中的應(yīng)用，屬于免疫化學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供了烏鱧Nramp具有優(yōu)勢(shì)抗原表位的多肽序列，該多肽由11個(gè)氨基酸殘基組成，其多肽的表位是烏鱧Nramp蛋白第318?328個(gè)氨基酸序列，具有很高的免疫原性和特異性。因此，可以將其用于制備抗烏鱧Nramp抗體的制備，從而為魚類Nramp蛋白相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)，因此具有良好的實(shí)際應(yīng)用之價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于免疫化學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗烏鱧Nramp抗體的抗原表位多肽及其在抗體制備中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

公開(kāi)該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對(duì)本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

近年來(lái)，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，但是養(yǎng)殖環(huán)境卻有惡化的趨勢(shì)，水產(chǎn)魚類在養(yǎng)殖過(guò)程中爆發(fā)的疾病越來(lái)越多，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)了極大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重制約了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。因此培育具有一定抗病力的魚類新品系是解決病害問(wèn)題的有效途徑，也是實(shí)現(xiàn)水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)健康發(fā)展的一種趨勢(shì)。

天然抗性相關(guān)巨噬蛋白(Nramp)基因作為一種抗病候選基因，與魚類的先天性免疫密切相關(guān)，在魚類的抗病研究中具有重要價(jià)值。天然抗性相關(guān)巨噬蛋白(Nramp)家族是一類抑制胞內(nèi)病原菌侵染的天然免疫相關(guān)蛋白。目前在人和小鼠等哺乳動(dòng)物中已發(fā)現(xiàn)兩種具有不同功能的天然抗性巨噬蛋白Nramp1和Nramp2。但在魚類中，除虹鱒(Nrampα和Nrampβ)外，發(fā)現(xiàn)的Nramp蛋白只有一種，氨基酸序列對(duì)比分析研究表明，魚類的Nramp基因與哺乳類Nramp2的同源性要高于Nramp1的同源性，但其功能卻與Nramp1相似。然而，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，目前針對(duì)魚類Nramp的用于實(shí)驗(yàn)室研究的抗體和蛋白仍鮮有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

基于上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種抗烏鱧Nramp抗體的抗原表位多肽及其在抗體制備中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，成功獲得一種抗烏鱧Nramp抗體的優(yōu)勢(shì)抗原表位多肽，并以其作為抗原成功制備了烏鱧Nramp多克隆抗體，從而為進(jìn)一步研究魚類Nramp的作用與功能奠定了基礎(chǔ)，因此具有良好的實(shí)際應(yīng)用之價(jià)值。

本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供一種抗烏鱧Nramp抗體的抗原表位多肽，所述多肽的氨基酸序列選自：包括或由SEQ?ID?NO.1構(gòu)成的序列。

所述多肽的表位是烏鱧Nramp蛋白的第318-328個(gè)氨基酸序列。

本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供上述抗原表位多肽在制備抗烏鱧Nramp抗體中的應(yīng)用。

其中，所述抗烏鱧Nramp抗體可以為單克隆抗體或多克隆抗體。

上述抗體可用于檢測(cè)烏鱧Nramp蛋白。

本發(fā)明的第三個(gè)方面，提供一種抗烏鱧Nramp抗體，所述抗烏鱧Nramp抗體其特異性結(jié)合烏鱧Nramp蛋白并且特異性識(shí)別上述抗原表位多肽。

本發(fā)明的第四個(gè)方面，提供編碼上述抗烏鱧Nramp抗體的核酸分子。

本發(fā)明的第五個(gè)方面，提供上述抗烏鱧Nramp抗體的制備方法，所述制備方法包括：針對(duì)上述抗原表位多肽構(gòu)成的抗原對(duì)非人動(dòng)物進(jìn)行免疫獲得。

本發(fā)明的第六個(gè)方面，提供一種用于檢測(cè)烏鱧Nramp蛋白的試劑盒，所述試劑盒包含上述抗烏鱧Nramp抗體。

本發(fā)明的第七個(gè)方面，提供一種檢測(cè)烏鱧Nramp蛋白的方法，所述方法包括：采用上述抗烏鱧Nramp抗體和/或上述試劑盒對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)。

上述一個(gè)或多個(gè)技術(shù)方案的有益技術(shù)效果：