[發(fā)明專利]miR-378-5p在系膜增生性腎小球腎炎中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111192346.2
• 申請(qǐng)日: 2021-10-13
• 公開（公告）號(hào): CN114015763A
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴勇;陳文標(biāo);湯冬娥
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市人民醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;A61K31/7105;A61P13/12
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 劉燚

本發(fā)明公開了定量檢測(cè)樣品中miR?378?5p的試劑在在制備系膜增生性腎小球腎炎的診斷產(chǎn)品中的應(yīng)用。根據(jù)本申請(qǐng)實(shí)施例的應(yīng)用，至少具有如下有益效果：申請(qǐng)人在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)細(xì)胞分泌的細(xì)胞外囊泡中的miR?378?5p具有延緩系膜增生性腎小球腎炎發(fā)展的功能，進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，該miRNA在MsPGN疾病患者的樣本中具有良好的敏感性和特異性。因此，miR?378?5p可以作為診斷系膜增生性腎小球腎炎的特異性靶點(diǎn)，通過定量其水平的試劑對(duì)受試者是否患有系膜增生性腎小球腎炎進(jìn)行檢測(cè)。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)涉及腎病技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及miR-378-5p在系膜增生性腎小球腎炎中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

系膜增生性腎小球腎炎(MsPGN)以系膜細(xì)胞彌漫性增殖和系膜基質(zhì)沉積為特征，可能導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化、不可逆的進(jìn)行性腎小球硬化和終末期腎病(ESRD)。作為一種原發(fā)性慢性腎炎，MsPGN是慢性腎臟疾病、慢性腎衰竭和尿毒癥的主要病因。然而，MsPGN的治療選擇有限，藥物干預(yù)抑制腎小球系膜細(xì)胞增殖和基質(zhì)積累是延緩疾病進(jìn)展的主要選擇。

間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一種具有分化和自我更新潛能的多能祖細(xì)胞，廣泛存在于臍帶血、脂肪組織和骨髓等多種組織中，由于其分泌能力強(qiáng)，是一種具有治療潛力的理想候選細(xì)胞。MSCs主要通過釋放細(xì)胞外囊泡(Evs)及其攜帶物，包括脂類、microRNAs(miRNAs)、mRNA和蛋白質(zhì)，參與組織修復(fù)。研究表明，間充質(zhì)干細(xì)胞的外囊泡(MSCs-Evs)中的主要功能性RNA成分是miRNAs，MSC-Evs的釋放允許細(xì)胞通過內(nèi)吞作用和/或融合將miRNA和其他生物活性分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中，從而與其他相鄰或遠(yuǎn)處的細(xì)胞進(jìn)行交流。MSC-Evs的作用取決于其miRNAs的特征，以此調(diào)節(jié)多個(gè)靶基因的表達(dá)并參與各種細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)過程。

MSC-Evs中miRNA的異常表達(dá)常與包括腎病在內(nèi)的多種疾病有關(guān)。在單側(cè)輸尿管梗阻的小鼠模型中，具有miR-let7c過表達(dá)的MSC歸巢于受損的腎臟，并升高了腎臟中的miR-let7c水平。在急性腎缺血再灌注損傷大鼠模型中，MSC-Evs的治療抑制了腎小管上皮細(xì)胞的線粒體分裂，恢復(fù)了受損腎臟的miR-30水平，并減少了細(xì)胞凋亡；而在用miR-30拮抗劑處理時(shí)，MSC-Evs的保護(hù)作用喪失。然而MSCs-Evs中miRNA在MsPGNZ中的作用則較少被關(guān)注。因此，在當(dāng)前治療選擇有限的情況下，有必要嘗試從中篩選出診療系膜增生性腎小球腎炎的特異性靶點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本申請(qǐng)旨在至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。為此，本申請(qǐng)?zhí)岢鲆环N能夠診療系膜增生性腎小球腎炎的特異性靶點(diǎn)，基于這一靶點(diǎn)miR-378-5p，提出其在系膜增生性腎小球腎炎的診斷產(chǎn)品或治療產(chǎn)品中的應(yīng)用。

本申請(qǐng)的第一方面，提供定量檢測(cè)樣品中miR-378-5p的試劑在在制備系膜增生性腎小球腎炎的診斷產(chǎn)品中的應(yīng)用。

根據(jù)本申請(qǐng)實(shí)施例的應(yīng)用，至少具有如下有益效果：

申請(qǐng)人在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)細(xì)胞分泌的細(xì)胞外囊泡中的miR-378-5p具有延緩系膜增生性腎小球腎炎發(fā)展的功能，進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，該miRNA在MsPGN疾病患者的樣本中具有良好的敏感性和特異性。因此，miR-378-5p可以作為診斷系膜增生性腎小球腎炎的特異性靶點(diǎn)，通過定量其水平的試劑對(duì)受試者是否患有系膜增生性腎小球腎炎進(jìn)行檢測(cè)。

在本申請(qǐng)的一些實(shí)施方式中，樣品選自組織、血液中的任一種。其中，組織包括但不限于取自受試者的新鮮組織樣品、福爾馬林固定后的組織樣品或石蠟包埋組織樣品，而血液包括但不限于取自受試者的外周血樣品。

在本申請(qǐng)的一些實(shí)施方式中，樣品選自血液的胞外囊泡。

在本申請(qǐng)的一些實(shí)施方式中，試劑選自探針、引物、基因芯片中的任一種。

本申請(qǐng)的第二方面，提供包含以下a1～a8中任一種材料的試劑在制備預(yù)防和/或治療系膜增生性腎小球腎炎的產(chǎn)品中的應(yīng)用：