[發(fā)明專利]光甘草定在制備沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制劑中的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111190671.5
• 申請(qǐng)日: 2021-10-13
• 公開（公告）號(hào): CN113786399A
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂強(qiáng)華;鄧旭明;宋澤宇;王建鋒;鄧彥宏;王琳;馮海華;邱家章;周永林
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/352
• 分類號(hào): A61K31/352;A61P31/04
• 代理公司: 深圳眾邦專利代理有限公司 44545
• 代理人: 李茂松

本發(fā)明涉及光甘草定在制備沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制劑中的應(yīng)用。以沙門氏菌感染HeLa細(xì)胞模型評(píng)價(jià)光甘草定對(duì)沙門氏菌介導(dǎo)的宿主細(xì)胞入侵和損傷的保護(hù)效果，光甘草定在有效濃度范圍內(nèi)不影響細(xì)菌的生長(zhǎng)，表明光甘草定給予細(xì)菌的選擇壓力小，從而降低了產(chǎn)生耐藥性的風(fēng)險(xiǎn)；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)以口服灌胃方式建立沙門氏菌感染小鼠模型，發(fā)現(xiàn)光甘草定顯著降低沙門氏菌感染小鼠的死亡率和靶器官菌落定植數(shù)，證明光甘草定對(duì)沙門氏菌感染具有保護(hù)作用。由于傳統(tǒng)抗生素的濫用和細(xì)菌耐藥性的不斷增強(qiáng)，光甘草定具有治療效果好，無(wú)耐藥性及藥物殘留的特點(diǎn)。因此，光甘草定用于制備抗沙門氏菌感染藥物具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及光甘草定在制備沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制劑中的應(yīng)用，屬于醫(yī)學(xué)制藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

沙門氏菌(Salmonella)屬于革蘭氏陰性兼性厭氧菌，分為邦戈沙門氏菌(S.bongori)和腸道沙門氏菌(S.enterica)兩個(gè)種屬，又分為腸道亞種(enterica)、薩拉姆亞種(salamae)、亞利桑那亞種(arizonae)、雙亞利桑那亞種(diarizonae)、豪頓亞種(houtenae)和印度亞種(indica)6個(gè)亞種，主要包含2600多種血清型，是導(dǎo)致食源性疾病的重要致病菌之一。沙門氏菌是歐盟第二大常見的人畜共患病致病菌，且大多數(shù)血清型來(lái)源于動(dòng)物性食品。沙門氏菌感染能夠引發(fā)胃腸炎型、類傷寒型、敗血癥型、感冒型和霍亂型食物中毒，主要癥狀以急性腸胃炎為主，伴有發(fā)熱、發(fā)冷、惡心、頭痛、全身乏力、腹瀉、嘔吐等癥狀。法國(guó)每年發(fā)生的食源性感染病例中，幾乎一半是由沙門氏菌引起的；在美國(guó)，沙門氏菌每年導(dǎo)致約120萬(wàn)種疾病、23000例住院治療和450例死亡。2013年至2017年間，歐洲國(guó)家因食用受污染的蛋制品和禽肉而引發(fā)的腸炎沙門氏菌病例不斷增加，給畜牧養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重威脅公共健康和食品安全。

雖然抗生素是最常用的治療和控制細(xì)菌感染的方法，但是大部分抗生素都是直接影響細(xì)菌生存關(guān)鍵元件并進(jìn)而殺死細(xì)菌，由于其極強(qiáng)的選擇性壓力誘導(dǎo)了細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生。Ⅲ型分泌系統(tǒng)(T3SS)主要由SPI-1和SPI-2兩個(gè)毒力島編碼，負(fù)責(zé)效應(yīng)蛋白的分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)，在細(xì)菌感染各個(gè)階段介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡以及全身性感染等方面都發(fā)揮著關(guān)鍵作用。其中，SPI-1在沙門氏菌侵襲上皮細(xì)胞過程中發(fā)揮決定性作用。由此可見，以T3SS為藥物靶標(biāo)，通過非殺菌方式而達(dá)到抗感染的目的，可以降低細(xì)菌本身的自然選擇性壓力，避免多重耐藥基因的產(chǎn)生。

光甘草定(Glabridin)是一種廣泛存在于植物甘草中的異黃烷類化合物。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，它具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎、降血糖血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)等多種藥理作用。目前，國(guó)內(nèi)外未見光甘草定在抑制沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)功能及制備抗沙門氏菌感染藥物中作用的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所述光甘草定CAS登錄號(hào)為59870-68-7，分子式為C₂₀H₂₀O₁₄，分子量為324.37。

光甘草定的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

本研究以沙門氏菌非生命必需成分Ⅲ型分泌系統(tǒng)為對(duì)象，構(gòu)建沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)報(bào)告系統(tǒng)，建立了Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制劑篩選平臺(tái)。經(jīng)過大量篩選鑒定，發(fā)現(xiàn)光甘草定在不影響細(xì)菌生長(zhǎng)的情況下顯著抑制沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)的功能，抑制沙門氏菌入侵HeLa細(xì)胞和Ⅲ型分泌系統(tǒng)介導(dǎo)的細(xì)胞損傷，對(duì)沙門氏菌感染小鼠具有良好保護(hù)作用。綜上，本研究為臨床上制備沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)抑制劑，為抗沙門氏菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)藥物的研發(fā)提供依據(jù)，為我國(guó)畜禽沙門氏菌感染創(chuàng)新藥物研發(fā)奠定良好基礎(chǔ)。

附圖說(shuō)明

圖1：光甘草定抑制效應(yīng)蛋白SipA的易位進(jìn)而抑制T3SS的功能(藍(lán)色表示效應(yīng)蛋白SipA的轉(zhuǎn)運(yùn)功能正常；綠色表示效應(yīng)蛋白SipA不能正常轉(zhuǎn)運(yùn))

圖2：光甘草定不影響鼠傷寒沙門氏菌的生長(zhǎng)(橫軸表示時(shí)間，縱軸表示測(cè)定值)