[發明專利]含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑、護膚品及制備方法

在審

• 申請號: 202111188805.X
• 申請日: 2021-10-12
• 公開（公告）號: CN114042029A
• 公開（公告）日: 2022-02-15
• 發明（設計）人: 胡火珍;周黎明;程琳;肖春;宋桂芹;張勇剛;劉康;楊燕
• 申請（專利權）人: 成都市古月永享生物科技有限公司
• 主分類號: A61K8/99
• 分類號: A61K8/99;A61K8/98;A61K8/64;A61K8/02;A61Q17/04;A61Q19/08;A61Q19/00;A61P37/04
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 陳熙

1.含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟(A1)人多能干細胞或臍帶華通氏膠來源的間充質干細胞培養并收集上清；

步驟(A2)將上清裝入透析袋，進行濃縮，收集濃縮液；

步驟(A3)向濃縮液中加入人血白蛋白，混勻；

步驟(A4)凍干。

2.根據權利要求1所述含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(A1)中，人多能干細胞或臍帶華通氏膠來源的間充質干細胞在37℃、5％CO₂的培養箱中培養并傳代，將上清移入無菌細胞培養瓶中，收集的上清放于4℃。

3.根據權利要求1所述含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(A2)中，在生物安全柜中，將上清裝入2000分子量透析袋，兩端用封口夾夾住，在容器中裝入PEG8000，再將裝有上清的透析袋放入容器中，然后在4℃條件下進行濃縮，濃縮為原體積的1/45，收集濃縮液。

4.根據權利要求1所述含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(A3)中，人血白蛋白的加入量為濃縮液體積的5％。

5.根據權利要求1所述含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(A4)中，將加入人血白蛋白后的濃縮液分裝入凍干瓶，每瓶3mL-5mL體積，放入-80℃冰箱存放，在一個月內將樣品凍干。

6.一種含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑，其特征在于，由如權利要求1至5任一項所述含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑的制備方法制備而成。

7.一種溶媒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：步驟(B1)分別稱取A相、B相、C相物質，分相混合，分別加熱到60℃-80℃處理30分鐘，攪拌均勻備用；其中以溶媒總質量的百分數計，A相包括EDTA0.03-0.09％、水43-49％、膠原蛋白粉1.2-1.7％、羊毛脂1.5-2.5％，B相包括透明質酸0.1-0.5％、丁二醇22-28％、3-O-乙基抗壞血酸1.5-2.5％，C相包括水8-12％、煙酰胺1-5％、VB51-4％、奧婷美1-4％；步驟(B2)各相溫度降至40℃，依次將B相、C相加入A相，攪拌均勻出料分裝。

8.一種溶媒，其特征在于，由如權利要求7所述溶媒的制備方法制備而成。

9.一種護膚品的制備方法，其特征在于，將如權利要求6所述的含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑加入到如權利要求8所述的溶媒中；其中，所述含人多能干細胞及華通氏膠來源間充質干細胞分泌物凍干粉復合制劑的質量為所述護膚品總質量的10％-40％。

10.一種護膚品，其特征在于，由如權利要求9所述護膚品的制備方法制備而成。