[發明專利]花生單株莢果數主效QTL位點qPN7的連鎖分子標記及其應用

有效

• 申請號: 202111185756.4
• 申請日: 2021-10-12
• 公開（公告）號: CN113736910B
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 張勝忠;陳靜;胡曉輝;苗華榮;王菲菲
• 申請（專利權）人: 山東省花生研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6806;C12N15/11;A01H1/04
• 代理公司: 青島合創知識產權代理事務所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

1.花生單株莢果數主效QTL位點qPN7的連鎖分子標記，其特征在于，所述連鎖分子標記與花生單株莢果數主效QTL位點qPN7共位于花生基因組第7染色體上，包括分子標記Marker4240、分子標記Marker4243和分子標記Marker4251；

所述分子標記Marker4240的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1或SEQ?ID?NO:2所示，多態性為A/G；所述Marker4243的核苷酸序列如SEQ?ID?No.3或SEQ?ID?NO:4所示，多態性為T/C；所述Marker4251的核苷酸序列如SEQ?ID?No.5或SEQ?ID?NO:6所示，多態性為C/T。

2.一種花生單株莢果數的鑒定方法，其特征在于，所述鑒定方法包括如下步驟：

提取待鑒定花生材料的基因組DNA，并以基因組DNA為模板，利用引物組合物對模板進行PCR擴增，對擴增產物進行測序分析，根據測序結果判斷所述權利要求1所述的連鎖分子標記的多態性；

根據待鑒定花生材料的測序結果，若所述連鎖分子標記Marker4240的基因型為G，分子標記Marker4243的基因型為C，分子標記Marker4251的基因型為T，則判斷該花生材料的單株莢果數大于或等于20；若所述連鎖分子標記Marker4240的基因型為A，分子標記Marker4243的基因型為T，分子標記Marker4251的基因型為C，則判斷該花生材料的單株莢果數小于20；

所述引物組合物包括6條引物，其核苷酸序列分別如SEQ?ID?No.7-?SEQ?ID?No.12所示。

3.根據權利要求2所述的鑒定方法，其特征在于，所述PCR擴增的反應程序為：94℃?5min；98℃?10?s，60℃?30?s，68℃?1?min，共35個循環；68℃?10?min延伸終止，4℃保存；所述PCR擴增的反應體系為50?μL，具體包括10~20?ng的DNA模板2?μL，引物對各1.5?μL，dNTP10?μL，KOD?buffer溶液25μL，KOD聚合酶1?μL，ddH₂O?9?μL。

4.檢測權利要求1所述的連鎖分子標記的引物組合物在選育高單株莢果數花生品種或品系中的應用，其特征在于，所述引物組合物包括6條引物，其核苷酸序列分別如SEQ?IDNo.7-?SEQ?ID?No.12所示；所述高單株莢果數是指單株莢果數大于或等于20。

5.檢測權利要求1所述的連鎖分子標記的引物組合物在高單株莢果數花生分子育種、培育轉基因高單株莢果數花生或高單株莢果數花生種質資源改良中的應用，其特征在于，所述引物組合物包括6條引物，其核苷酸序列分別如SEQ?ID?No.7-?SEQ?ID?No.12所示；所述高單株莢果數是指單株莢果數大于或等于20。