[發明專利]一種含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼及其制備方法

在審

• 申請號: 202111181764.1
• 申請日: 2021-10-11
• 公開（公告）號: CN113908111A
• 公開（公告）日: 2022-01-11
• 發明（設計）人: 李俊
• 申請（專利權）人: 李俊
• 主分類號: A61K8/99
• 分類號: A61K8/99;A61K8/98;A61K8/60;A61K8/73;A61K8/34;A61K8/37;A61K8/31;A61K8/92;A61K8/891;A61K8/9789;A61K8/67;A61K8/02;A61Q19/00;A61Q19/08
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙) 51229
• 代理人: 羅健龍

1.一種含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼，其特征在于，所述眼膜貼包括眼膜布和浸潤于所述眼膜布上的精華液；所述精華液以總質量100份計，包含以下質量份的組分：外泌體脂質體0.05-0.1％、卡波姆0.05-0.15％、抗菌劑0.5-1.5％、酵母提取物0.5-1.5％、透明質酸0.5-1％、乙二胺四乙酸二鈉0.1-0.3％、丁香提取物0.1-1.0％、膠原蛋白0.5-1.5％、鯨蠟硬脂基葡糖苷或鯨蠟硬脂醇2-3％、小麥芽胚油3-4％、聚二甲基硅氧烷2-3％、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯2-3％、角鯊烷3-5％、生育酚0.1-1.0％、霍霍巴油1-3％、海藻糖1-3％、丙二醇2-3％、甘油5-7％，其余為無菌水。

2.根據權利要求1所述的含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼，其特征在于，所述精華液以總質量100份計，包含以下質量份的組分：外泌體脂質體0.05-0.1份、卡波姆0.05-0.15份、抗菌劑0.5-1.5份、酵母提取物0.5-1.5份、透明質酸0.5-1份、乙二胺四乙酸二鈉0.1-0.3份、丁香提取物0.1-1.0份、膠原蛋白0.5-1.5份、鯨蠟硬脂基葡糖苷或鯨蠟硬脂醇2-3份、小麥芽胚油3-4份、聚二甲基硅氧烷2-3份、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯2-3份、角鯊烷3-5份、生育酚0.1-1.0份、霍霍巴油1-3份、海藻糖1-3份、丙二醇2-3份、甘油5-7份，其余為無菌水。

3.根據權利要求1或2所述的含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼，其特征在于：所述無菌水替換為玫瑰純露。

4.根據權利要求1或2所述的含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼，其特征在于，所述外泌體脂質體由以下步驟制得：將磷脂和膽固醇按液料比4～6mL:1～2g混合后，溶解于乙醚中，其后蒸發以去除乙醚，至混合溶液在容器底部形成均勻薄膜層后停止；再向容器中加入臍帶干細胞外泌體重懸液，震蕩至薄膜均勻包裹臍帶干細胞外泌體重懸液即可。

5.根據權利要求4所述的含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼，其特征在于，所述臍帶干細胞外泌體重懸液由以下步驟制得：

(1)新鮮臍帶用含青霉素或鏈霉素的生理鹽水浸洗，排除殘余血漬后，剔除臍帶中的血管，然后剝離臍帶中的華通氏膠，再將其剪碎成碎片；

(2)將所得碎片接種于含DMEM培養基的培養瓶中培養，當細胞融合達到70-80％時進行細胞傳代；

(3)收集傳代至第3-5代時的培養液上清，轉移上清離心去除活細胞后，再次離心去除死細胞；

(4)取離心后的上清過濾，收集濾液；

(5)濾液超速離心去掉上清，再用PBS重懸，然后再次超速離心去掉上清，所得濾液用PBS重懸，即得。

6.根據權利要求5述的含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼，其特征在于：所述步驟(5)中超速離心條件為4℃、100000xg下離心70min。

7.根據區權利要求1或2所述的含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼，其特征在于，所述酵母提取物經過以下步驟制得：酵母經破壁處理后進行抽提，再經生物酶解，即得。

8.根據區權利要求1或2所述的含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼，其特征在于，所述丁香提取物經過以下步驟制得：丁香粉與色拉油按料液比1g:1～3mL混合后，浸提5～6天，過濾，即得。

9.根據權利要求1～8所述的含臍帶干細胞外泌體的眼膜貼的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將鯨蠟硬脂基葡糖苷或鯨蠟硬脂醇、小麥芽胚油、聚二甲基硅氧烷、辛酸三酸甘油酯或癸酸三酸甘油酯、角鯊烷、生育酚和霍霍巴油混合，得B相液體；

(2)將海藻糖、丙二醇、甘油和無菌水混合后，攪拌均勻，得A相液體；

(3)將B相液體加熱至70-80℃，并加入A相液體中，進行均質乳化；

(4)當(3)中所得液體溫度降至40-45℃時，加入卡波姆、抗菌劑、酵母提取物、透明質酸、乙二胺四乙酸二鈉、丁香提取物和膠原蛋白，攪拌混合均勻；

(5)當(4)中所得液體溫度降至20-25℃時，加入外泌體脂質體，攪拌混合均勻，得眼貼膜精華液；

(6)將眼膜布浸泡在眼貼膜精華液中封裝即可。