[發(fā)明專利]一種用于觀察液-液相分離的裝置及方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111176310.5
• 申請日: 2021-10-09
• 公開（公告）號: CN114113078A
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王艷偉;劉柱梁;程順華;何姝芃;祝澤棟;郭通;伊藝
• 申請（專利權(quán)）人: 溫州大學(xué);浙江東方職業(yè)技術(shù)學(xué)院
• 主分類號: G01N21/84
• 分類號: G01N21/84;G01N21/01
• 代理公司: 溫州名創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33258
• 代理人: 朱海曉

本發(fā)明屬于單分子成像技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于觀察液?液相分離的裝置及方法。其中裝置包括光學(xué)倒置顯微鏡、控溫裝置；所述控溫裝置上設(shè)有控溫臺，所述控溫臺上開設(shè)有通孔，所述光學(xué)倒置顯微鏡的觀察鏡頭位于通孔的下方，以及其光源位于通孔的上方；所述控溫裝置可控制控溫臺的溫度為一定溫度區(qū)間中的具體溫度值。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，可以通過提高一定的溫度而使鏈長在5000bp以下的DNA形成所需要的小液滴。從而方便液液相分離的研究。此方法也適用于形成冷凝物。對于眾多學(xué)者來說，既提高了實(shí)驗(yàn)效率，也節(jié)約了試驗(yàn)成本。因?yàn)榉椒ú僮骱唵危灿欣谑褂谜卟僮鳌?/p>

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于單分子成像技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于觀察液-液相分離的裝置及方法。

背景技術(shù)

液-液相分離(LLPS)已經(jīng)成為生物學(xué)中一個(gè)重要的組織原則。細(xì)胞內(nèi)成分的相分離最近被認(rèn)為是細(xì)胞實(shí)現(xiàn)無膜組織的一種機(jī)制。細(xì)胞是被許多膜封閉的細(xì)胞器和無膜隔室隔開。以融合和裂變，囊泡介導(dǎo)的運(yùn)輸和膜接觸介導(dǎo)的細(xì)胞間相互作用被稱為膜結(jié)合的細(xì)胞器動力學(xué)的分子機(jī)制，已被廣泛表征。然而，無膜隔室的研究還在如火如茶的進(jìn)行。最近越來越多的證據(jù)表明，通過液-液相分離（LLPS）組裝了許多無膜隔室，這些隔室統(tǒng)稱為生物大分子冷凝物。相分離的冷凝物與各種生物活動息息相關(guān)，包括，DNA的轉(zhuǎn)錄，基因的表達(dá)以及蛋白質(zhì)的自噬降解等。液-液相分離的形成也與許多疾病的治療有著重要作用。例如，帕金森綜合征和阿爾茲海默癥等。室溫狀態(tài)下，以DNA為例，鏈長在5000bp以下的DNA在室溫的情況下不會形成圓潤且規(guī)則的液滴，從而阻礙研究者們對LLPS的研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)和不足，而提供一種用于觀察液-液相分離的裝置及方法。

本發(fā)明所采取的技術(shù)方案如下：. 一種用于觀察液-液相分離的裝置，包括光學(xué)倒置顯微鏡、控溫裝置；

所述控溫裝置上設(shè)有控溫臺，所述控溫臺上開設(shè)有通孔，所述光學(xué)倒置顯微鏡的觀察鏡頭位于通孔的下方，以及其光源位于通孔的上方；所述控溫裝置可控制控溫臺的溫度為一定溫度區(qū)間中的具體溫度值。

所述控溫臺為半導(dǎo)體控溫件。

所述控溫裝置還包括水循環(huán)裝置，所述水循環(huán)裝置具有兩個(gè)且分別分布于控溫臺兩側(cè)，所述水循環(huán)裝置連接水循環(huán)控溫管路系統(tǒng)。

一種液-液相分離觀察方法，其采用如上述的用于觀察液-液相分離的裝置，其方法包括以下步驟：

一、將蓋玻片平放于光學(xué)倒置顯微鏡的觀察鏡頭上；

二、將控溫裝置放置在光學(xué)倒置顯微鏡中使光學(xué)倒置顯微鏡的光源透過通孔照射于蓋玻片上；

三、調(diào)制控溫設(shè)備，設(shè)置所需溫度和時(shí)間；

四、將被測液體用移液槍從控溫臺的通孔處滴入到蓋玻片上；

五、調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，觀察玻片快貼于控溫臺時(shí)，調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋直至目鏡視野清晰；

六、觀察、記錄。

步驟一中，觀察鏡頭采用油鏡，油鏡鏡頭滴油，使蓋玻片平放于鏡頭上。

步驟六中，靜置30-120 s后進(jìn)行記錄。

本發(fā)明的有益效果如下：本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，可以通過提高一定的溫度而使鏈長在5000bp以下的DNA形成所需要的小液滴。從而方便液液相分離的研究。此方法也適用于形成冷凝物。對于眾多學(xué)者來說，既提高了實(shí)驗(yàn)效率，也節(jié)約了試驗(yàn)成本。因?yàn)榉椒ú僮骱唵危灿欣谑褂谜卟僮鳌?/p>

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動性的前提下，根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖仍屬于本發(fā)明的范疇。

圖1為本發(fā)明所提供的用于觀察液-液相分離的裝置的結(jié)構(gòu)示意圖，圖中未畫出光學(xué)倒置顯微鏡的機(jī)體；