[發明專利]一種側鏈酯化抗菌肽WLC6及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202111170092.4
• 申請日: 2021-10-08
• 公開（公告）號: CN114195863B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 單安山;來振衡;袁曉潔
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/14;C07K1/20;A61K38/10;A61P31/04
• 代理公司: 哈爾濱市哈科專利事務所有限責任公司 23101
• 代理人: 吳振剛

本發明提供一種側鏈酯化抗菌肽WLC6及其制備方法和應用。側鏈酯化抗菌肽WLC6，序列為WLKKLKKK(C6)LKKLK(C6)KK，其中C6為正己烷酸。制備方法是：利用標準α螺旋七肽重復序列“abcdefg”為基礎，利用Leu和Lys設計出基礎序列，對第8位置和第13位置的Lys側鏈進行正己烷酸脂酰化修飾，得出側鏈酯化抗菌肽WLC6。該抗菌肽WLC6在治療革蘭氏陰性菌和/或革蘭氏陽性菌感染性疾病的藥物中的應用。其具有高效抑菌活性的同時具有較低的溶血活性及較高的鹽粒子穩定性，并通過物理性破膜機制殺死細菌。具有成為高效抗生素替代品治療包括耐藥菌在內的細菌感染的潛力。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種側鏈酯化抗菌肽WLC6及其制備方法和應用。

背景技術

自從1929年弗萊明發現青霉素以來，越來越多的抗生素被廣泛應用于醫藥衛生、食品安全和畜牧生產等多個領域。隨著抗生素的大量使用甚至是濫用，人類對抗生素的不規范使用最終會導致耐藥菌株的不斷出現。尤其是新德里金屬-β-內酰胺酶(NDM-1)和多重耐藥性鮑曼不動桿菌(MRAB)的出現，使全世界面臨進入“后抗生素時代”的階段。目前很多國家已經意識到這個問題的嚴重性，紛紛開始出臺各種政策法規限制抗生素的使用。因此，目前尋找一種高效抗菌、低毒性、無殘留和無污染的抗菌藥物成了各國科研人員研究的焦點和重點。

抗菌肽(antimicrobial?peptides,AMPs)是一類具有廣譜抗菌活性、結構多樣性的短肽，在脊椎動物中，許多抗菌肽可以為機體提供保護，并在先天免疫系統中起調節作用。與抗生素通常作用于少數特定靶點的作用機理不同，大部分抗菌肽通過物理性吸附并迅速滲透和破壞細菌膜的基本成分來殺死細菌。抗菌肽還可作用于微生物生物合成過程，如DNA、蛋白質、細胞壁合成和蛋白質折疊等來發揮抗菌效果。

目前，三千多種天然抗菌肽已經在動物、植物和微生物中被廣泛提取分離鑒定。但天然抗菌肽通常在機體內含量甚微，其分離提純難度很大。并且天然抗菌肽在生物體內通常起免疫調節的作用，其還面臨著直接的生物學活性低，毒性大，穩定性低等缺點，很難直接作為專一的抗生素直接應用于臨床。所以利用生物工程手段全新設計具有高效抗菌活性，低毒性和高穩定性的抗菌肽成為一條有效途徑，在豐富抗菌肽家族的同時，也為新型抗菌肽制劑研制和開發開辟新道路。

發明內容

基于以上不足之處，本發明提供一種側鏈酯化抗菌肽WLC6，解決天然抗菌肽活性低、毒性高、穩定性差等問題。

本發明所采用的技術方案如下：一種側鏈酯化抗菌肽WLC6，序列如下：WLKKLKKK(C6)LKKLK(C6)KK，其中C6為正己烷酸，其對第8位置和第13位置的Lys側鏈進行正己烷酸脂酰化修飾。

本發明的另一目的是提供一種側鏈酯化抗菌肽WLC6的制備方法，如下：利用標準α螺旋七肽重復序列“abcdefg”，其中“a”和“d”位置為疏水性氨基酸，其它位置為親水性氨基酸為基礎，采用Leu和Lys設計出基礎序列WLKKLKKKLKKLKKK，進一步的根據α螺旋結構對七肽重復序列第8位置和第13位置的Lys側鏈進行正己烷酸脂酰化修飾，增加螺旋分子之間的相互作用，設計出新型側鏈酯化抗菌肽WLC6，其序列如下：WLKKLKKK(C6)LKKLK(C6)KK。

本發明的另一目的在于提供如上所述的一種側鏈酯化抗菌肽WLC6在治療革蘭氏陰性菌和/或革蘭氏陽性菌感染性疾病的藥物中的應用。

進一步的，如上所述的革蘭氏陰性菌為多重耐藥大腸桿菌E.coli?HZP73、E.coliHZP74和E.coli?CLNP19。

進一步的，如上所述的革蘭氏陽性菌為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌。