[發明專利]IgDR基因、IgDR單克隆抗體及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202111159853.6
• 申請日: 2021-09-30
• 公開（公告）號: CN113817743B
• 公開（公告）日: 2023-10-03
• 發明（設計）人: 魏偉;吳育晶;胡曉曦
• 申請（專利權）人: 魏偉
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/70;C07K14/735;C07K16/28;C07K1/22;C07K1/18;C07K1/16;G01N33/68;G01N33/577
• 代理公司: 合肥云道爾知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 34230
• 代理人: 陳蘭

本發明公開了IgDR基因、IgDR單克隆抗體及其制備方法與應用。其中，IgDR基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；IgDR單克隆抗體系以上述IgDR基因的編碼蛋白作為抗原，利用雜交瘤單克隆抗體技術制備得到。本發明提供了IgDR基因的核苷酸和氨基酸序列，以及利用IgDR基因制備得到高特異性、高親和力的IgDR單克隆抗體。利用IgDR單克隆抗體制備檢測IgDR的相關產品，可以提供對IgDR進行準確定性、定量、定位的手段，可廣泛應用于臨床診斷及科研工作，為醫學、藥學和生物學領域進行IgD及IgDR的研究提供一種新的思路和解決途徑。

技術領域

本發明涉及單克隆抗體制備及免疫應用技術領域，尤其涉及IgDR基因、IgDR單克隆抗體及其應用，以及IgDR單克隆抗體的制備方法。

上述IgDR基因以下簡稱為IgDR。

背景技術

免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)也稱為抗體，由B細胞在抗原刺激下增殖分化為漿細胞產生，是介導體液免疫的重要效應分子，并參與免疫系統的調節。根據Ig重鏈恒定區免疫原性不同，目前已知有五類包括IgM、IgG、IgA、IgE和IgD，各個Ig及效應細胞的微妙平衡共同維持人體正常生理，一旦平衡打破可能導致自身免疫性疾病發生。目前免疫學對IgM、IgG、IgA和IgE功能已有較深入的研究，但對IgD的了解仍然有限。IgD最早是由Rowe和Fahey于1965年在一名骨髓瘤患者的血清中發現，主要包括膜結合型IgD(membrane IgD,mIgD)和分泌型IgD(secreted IgD,sIgD)。在人、小鼠中作為B細胞表面受體以膜結合型的形式發揮作用，mIgD參與B細胞發育、免疫功能和耐受。sIgD可作為抗體發揮作用。sIgD的血清濃度變異較大，并且在人類鼻、鼻咽、口腔和淚液中也有少量分泌。已有研究發現sIgD參與粘膜免疫反應，可通過定植在粘膜部位，與共生菌群建立相互作用來調節粘膜穩態。異常升高的sIgD可能在IgD骨髓瘤、皮膚過敏、各種感染性和自身免疫性疾病等患者出現。

免疫反應中，Ig等抗體通過其Fab段識別特定抗原，抗體介導的生物活性需要其Fc部分。決定免疫球蛋白類別的Fc段可通過與在各種細胞的膜上表達的Fc受體(FcR)結合發揮不同類別免疫球蛋白介導的多樣生物活性。體內和體外研究表明，表達在不同免疫細胞上的IgDR如同“效應器”對外周循環中IgD發揮生理、病理等功能起到重要的調節作用。免疫學家已通過分子生物學等技術證明IgM、IgG、IgA和IgE均存在特異性的FcR，并進行了大量結構和免疫功能的相關研究。1980年首次發現人類外周血T細胞和非T細胞表達IgDR。然而神秘IgD的特異性FcR(FcδR,IgDR)至今尚未被克隆，僅通過綿羊紅細胞玫瑰花結實驗、放射免疫技術和流式細胞術等方法間接證明其存在。由于IgDR的氨基酸序列至今未知，成為深入研究IgD及IgDR生理功能和病理作用的瓶頸問題，也是醫學、藥學和生物學領域亟待解決的問題。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種IgDR基因。

本發明要解決的另外一個技術問題是提供一種IgDR單克隆抗體。

本發明還要解決的一個技術問題是提供一種IgDR單克隆抗體的制備方法。

本發明還要解決的一個技術問題是提供了一種體外檢測/診斷試劑盒。

對于IgDR基因，本發明采用的技術方案是，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其編碼蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

作為優選，IgDR基因為特異性與人源IgD的Fc段結構域結合的Fc受體(FcR)。

對于IgDR單克隆抗體，本發明采用的技術方案是，系以IgDR基因的編碼蛋白(下稱IgDR蛋白)作為抗原，利用雜交瘤單克隆抗體技術制備得到。

對于IgDR單克隆抗體的制備方法，本發明采用的技術方案是，包括以下步驟：