[發(fā)明專利]一種輔助鑒定待測(cè)小麥抗旱性的方法及其專用的分子標(biāo)記

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111148948.8
• 申請(qǐng)日: 2021-09-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113652423B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-06-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 毛虎德;康振生;簡(jiǎn)超;黃雪玲;程新秀
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 閆書(shū)寧

本發(fā)明公開(kāi)了一種輔助鑒定待測(cè)小麥抗旱性的方法及其專用的分子標(biāo)記。以待測(cè)小麥的基因組DNA為模板，采用引物F和引物R組成的引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到DNA片段；該DNA片段即為與小麥抗旱性相關(guān)的分子標(biāo)記。分子標(biāo)記具體可為DNA區(qū)段甲或DNA區(qū)段乙。引物F、引物R、DNA區(qū)段甲和DNA區(qū)段乙的核苷酸序列依次如SEQ?ID?NO:12、SEQ?ID?NO:13、SEQ?ID?NO:14和SEQ?ID?NO:15所示。基因組中含有DNA區(qū)段乙且不含有DNA區(qū)段甲的小麥品種具有抗旱性。應(yīng)用本發(fā)明提供的分子標(biāo)記，能快速篩選出具有抗旱性的小麥品種，從而加速小麥品種的育種步伐。本發(fā)明具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種輔助鑒定待測(cè)小麥抗旱性的方法及其專用的分子標(biāo)記。

背景技術(shù)

植物在復(fù)雜多變的環(huán)境中生長(zhǎng)發(fā)育，常受到逆境脅迫，其中干旱是影響和限制植物生長(zhǎng)發(fā)育的主要逆境因子，甚至?xí)?dǎo)致植物死亡，嚴(yán)重影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。因此，培育抗旱作物品種一直是農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)研究的主要目標(biāo)之一。

小麥(TriticumaestivumL.)是全世界人民最主要的碳水化合物和蛋白質(zhì)來(lái)源。盡管全球小麥種植面積和產(chǎn)量取得了突飛猛進(jìn)的增長(zhǎng)，但是干旱、高溫、高鹽等非生物逆境嚴(yán)重影響小麥產(chǎn)量，迫切需要尋找有效的育種手段來(lái)提高小麥產(chǎn)量。在諸多環(huán)境脅迫因素中，干旱對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的威脅是最嚴(yán)重的一個(gè)世界性問(wèn)題。研究表明，作物耐旱性遺傳改良的關(guān)鍵是優(yōu)良耐旱基因的克隆和利用。因此，小麥抗旱基因的挖掘?qū)ε嘤购敌←溒贩N并提高小麥產(chǎn)量具有重要意義。分子標(biāo)記輔助選擇可以從分子水平上快速準(zhǔn)確地分析個(gè)體的遺傳組成，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)基因型的直接選擇，進(jìn)行分子育種；其不受環(huán)境條件影響且選擇準(zhǔn)確性高，因此開(kāi)發(fā)與小麥抗旱相關(guān)的分子標(biāo)記具有較大意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是輔助鑒定待測(cè)小麥的抗旱性。

本發(fā)明首先保護(hù)特異引物對(duì)，可由用于擴(kuò)增特異DNA片段的兩條引物組成；所述特異DNA片段中具有小麥基因組中引物F和引物R組成的引物對(duì)的靶序列；

所述引物F可為如下a1)或a2)：

a1)SEQ?ID?NO:12所示的單鏈DNA分子；

a2)將SEQ?ID?NO:12經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與SEQID?NO:12具有相同功能的DNA分子；

所述引物R可為如下a3)或a4)：

a3)SEQ?ID?NO:13所示的單鏈DNA分子；

a4)將SEQ?ID?NO:13經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與SEQID?NO:13具有相同功能的DNA分子。

所述特異引物對(duì)具體可由所述引物F和所述引物R組成。

所述特異引物對(duì)的功能可為如下b1)-b4)中的任一種：

b1)輔助鑒定待測(cè)小麥的抗旱性；

b2)輔助篩選具有或疑似具有抗旱性的小麥品種；

b3)輔助篩選不具有或疑似不具有抗旱性的小麥品種；

b4)小麥育種。

所述特異引物對(duì)用于擴(kuò)增下述與小麥抗旱性相關(guān)的分子標(biāo)記。

本發(fā)明還保護(hù)一種試劑盒，包括上述任一所述特異引物對(duì)。

所述試劑盒中還可包括用于PCR擴(kuò)增的常規(guī)試劑和/或用于基因組提取的常規(guī)試劑和/或用于瓊脂糖凝膠電泳的常規(guī)試劑。

所述試劑盒的功能可為如下b1)-b4)中的任一種：

b1)輔助鑒定待測(cè)小麥的抗旱性；