[發明專利]一株耐鹽促生微桿菌及其應用和基于其的活菌制劑

在審

• 申請號: 202111147681.0
• 申請日: 2021-09-29
• 公開（公告）號: CN113637616A
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 丁小維;劉開輝;陳妮
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/20;A01P21/00;C05F11/08;C12R1/01
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 高博

本發明公開了一株在鹽堿環境下可以促進油菜耐鹽，增加油菜組織亞油酸含量和降低芥子酸含量的根際微桿菌，屬于生物技術領域。本發明經過如下方法得到：保藏號為CGMCC No.22803的菌株N1分離自中國西藏鹽堿地，通過在無氮Ashby培養基上培養初步鑒定該菌株具有生物固氮能力，基于形態學和16Sr RNA序列的系統發育關系，將該菌株鑒定為微桿菌屬細菌(Microbacterium sp.)。栽培試驗研究表明，供試油菜根際接種了N1菌株后，其生物量、根長及株高明顯優于對照組；菌株N1共培養能顯著誘導植株積累多種氨基酸、可溶性糖類耐滲透壓物質，并顯著增加亞油酸含量和降低芥子酸含量。該菌株在植物促生微生態菌劑及油菜功能菌肥開發方面具有廣泛的應用價值。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一株耐鹽根際促生微桿菌及其應用。

背景技術

土壤鹽堿化是制約我國農業發展的關鍵因素之一。據報道，我國鹽堿地約1億公頃，其中鹽堿耕地達920萬公頃。鹽堿土滲透壓增大、土體通透性和透水性變差以及土壤養分有效性降低，造成植物生理干旱、危害作物生長發育和產量，甚至導致植株大面積死亡，造成森林和草原退化，加劇荒漠化，對生態系統危害極大。而微生物菌劑能活化并促進植物對營養元素的吸收，提高作物耐鹽性和產量。因此微生物菌劑是改良鹽堿地的有效手段之一。

目前，已報道多種微生物具有提高植物耐鹽的作用，如解鉀菌短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus MZ4)、解磷菌鏈霉菌(Streptomyces sp.H29)、產生長素菌糞產堿桿菌(Alcaligenes faecalis JBCS1294)、耐Pb促生菌芽孢桿菌(Bacillus sp.YM.1)。在鹽堿土壤中，這些微生物的生長以及生物活性會受到氮素匱乏的限制。固氮菌能通過生物固氮作用有效增加土壤肥力，明顯促進土壤菌群的活性以及調控植物生長發育。有報道顯示，從甘蔗組織中分離到的一株內生固氮泛菌屬細菌(Pantoea sp.NN08200)能高效固氮并促進甘蔗的生長；有研究發現，從野生水稻中分離的克雷伯氏固氮菌(Klebsiella variicolaCX24)，具有較高的固氮酶活性和溶磷性，具有分泌生長素和產鐵載體能力，能夠有效促進水稻種子的萌發和植株生長。這表明固氮菌在促進植物生長方面具有顯著優勢。目前所報道的植物促生固氮菌多來自于普通環境。在鹽堿土壤中，施加從普通環境分離的固氮促生菌，其生物活性往往受高鹽離子的抑制。因此，從鹽堿土壤中分離篩選耐(嗜)鹽促生固氮菌在增強植物耐鹽逆境及修復鹽堿化土壤方面具有更廣闊的應用前景。

油菜是重要的油料作物。甘藍型油菜是油用油菜中籽粒產量最高的種類，在中國南北各地區均有大量種植，也是我國重要的經濟農作物。甘藍型油菜不僅可生產食用油，而且其餅粕富含蛋白質，也可作為動物飼料。該油菜品種雖具有一定的抗逆性，但其種子萌發期和苗期生長對土壤鹽度比較敏感，在中高鹽濃度土壤中種植該品種油菜時，易出現種子萌發率低以及缺苗現象。

因此，挖掘促進鹽堿地油菜生長的耐(嗜)鹽微生物功能菌株，在提高油菜耐鹽性及改善菜籽油品質方面具有潛在應用前景，在促進油菜種植及改良鹽堿土壤等方面具有重要意義。

發明內容

為了克服上述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一株促進鹽堿地植物生長的細菌菌株及應用和基于其的活菌制劑。

為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案予以實現：

一種耐鹽促生微桿菌，其分類命名為微桿菌屬Microbacterium sp.，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2021年6月30日，保藏號為CGMCCNo.22803。

所述耐鹽促生微桿菌是由中國西藏鹽堿荒漠采集的鹽堿化土壤制成的稀釋液在Ashby培養基上，32℃恒溫培養2-3d，分離純化得到。

本發明還公開了耐鹽促生微桿菌在提高油菜耐鹽性、改善菜籽油品質，以及促進鹽堿地油菜功能菌肥方面的應用。