[發明專利]一種預測玉米植株氮素狀態的方法及引物組

在審

• 申請號: 202111145637.6
• 申請日: 2021-09-28
• 公開（公告）號: CN113832218A
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發明（設計）人: 寧麗華;石習;趙涵
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851;C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 楊文晰

1.一種預測玉米植株氮素狀態的方法，其特征在于，具體步驟如下：

分別以鄭58或玉米樣品cDNA為模板，進行實時定量PCR檢測；再以鄭58中基因Zm00001d039049、基因Zm00001d037680、基因Zm00001d024281的表達量，與樣品對應基因表達量進行比較，獲得樣品中基因Zm00001d039049、基因Zm00001d037680、基因Zm00001d024281的相對表達量，分別計為x4、x3、x2；

將x4、x3、x2帶入函數Y=1.143+0.017*x2+0.017*x3-0.302*x4，即獲知樣品氮含量預測值Y；

若Y＞1.30，則認為玉米生長達到正常狀態，不需要補充氮肥；若Y＜1.22，則認為玉米生長未達到正常狀態，需要補充氮肥。

2.如權利要求1所述預測玉米植株氮素狀態的方法，其特征在于，步驟2）所述實時定量PCR檢測是指，以鄭58或玉米樣品cDNA為模板，分別以基因Zm00001d039049、或基因Zm00001d037680、或基因Zm00001d024281的上游引物為引物I，以基因Zm00001d039049、或基因Zm00001d037680、或基因Zm00001d024281的下游引物為引物II，進行實時定量PCR檢測。

3.根據權利要求2所述預測玉米植株氮素狀態的方法，其特征在于，步驟2）所述實時定量PCR檢測是指，

PCR反應體系：2×ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix 10微升；10 μM的引物I0.4微升；10 μM的引物II 0.4微升；濃度為100ng/微升的cDNA， 1微升；ddH₂O，8.2微升；

PCR反應程序：95°C預變性3分鐘；95℃變性30秒，60℃退火20秒，72℃延伸30秒，40個循環。

4.根據權利要求2所述預測玉米植株氮素狀態的方法，其特征在于，步驟2）中基因Zm00001d039049上游引物、下游引物的核苷酸序列分別如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；

基因Zm00001d037680上游引物、下游引物的核苷酸序列分別如SEQ ID NO.3和SEQ IDNO.4所示；

基因Zm00001d024281上游引物、下游引物的核苷酸序列分別如SEQ ID NO.5和SEQ IDNO.6所示。

5.一組用于預測玉米植株氮素狀態的引物，包括：

用于檢測Zm00001d039049基因的上游引物和下游引物，他們的核苷酸序列分別如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示；

用于檢測Zm00001d037680基因的上游引物和下游引物，他們的核苷酸序列分別如SEQID NO.3和SEQ ID NO.4所示；

用于檢測Zm00001d024281基因的上游引物和下游引物，他們的核苷酸序列分別如SEQID NO.5和SEQ ID NO.6所示。