[發明專利]一種藥物制劑的HPLC特征圖譜的檢測方法

有效

• 申請號: 202111142138.1
• 申請日: 2021-09-28
• 公開（公告）號: CN113866306B
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 高婷婷;謝元彪;王玲;李淞明;詹常森;張正光
• 申請（專利權）人: 上海和黃藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/36
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

1.一種藥物制劑的HPLC特征圖譜的檢測方法，包括：將藥物制劑樣品加入溶劑溶解后超聲提取、冷卻、搖勻、過濾，取續濾液獲得的供試品溶液，采用高效液相色譜法進行檢測，再根據保留時間對獲得的供試品溶液的特征圖譜中的指標成分進行歸屬定位，從而獲得藥物制劑的特征圖譜；藥物制劑為開心散；

所述采用高效液相色譜法進行檢測，包括以下步驟：

1）參照物溶液的制備：將人參皂苷Rg₁、人參皂苷Re、遠志口山酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖、細葉遠志苷A、β-細辛醚、茯苓酸的對照品，加入溶劑溶解并定容，配成參照物溶液；

2）測定：采用高效液相色譜法分別測定供試品溶液和步驟1）中的參照物溶液，獲得供試品溶液的特征圖譜和參照物溶液的特征圖譜，將供試品溶液的特征圖譜與參照物溶液的特征圖譜比較保留時間進行定性，對供試品溶液特征圖譜中的指標成分進行歸屬定位，從而獲得藥物制劑的特征圖譜；

步驟2）中，所述高效液相色譜法的測定條件為：檢測器為二極管陣列檢測器；色譜柱為C₁₈色譜柱，色譜柱中的填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；檢測波長為200-205nm；流動相為乙腈-0.05-0.15%磷酸水溶液，其中，A相為乙腈，B相為0.05-0.15%磷酸水溶液；分析時間為102min；梯度洗脫；

所述梯度洗脫的具體程序為：0~35min，A相：B相體積比為10：90-21：79；35~53min，A相：B相體積比為21：79-23：77；53~68min，A相：B相體積比為23：77-45：55；68~78min，A相：B相體積比為45：55-75：25；78~100min，A相：B相體積比為75：25-95：5；100~102min，A相：B相體積比為95：5-95：5。

2.根據權利要求1所述的一種藥物制劑的HPLC特征圖譜的檢測方法，其特征在于，所述供試品溶液的獲得包括以下條件中任一項或多項：

A1）所述藥物制劑樣品加入的質量與溶劑加入的體積之比為2:25~75，g/mL；

A2）所述溶劑選自70%甲醇、甲醇、乙醇或水中一種；

A3）所述超聲提取的時間為30-60分鐘。

3.根據權利要求1-2任一所述的一種藥物制劑的HPLC特征圖譜的檢測方法在藥物制劑的質量檢測中的用途；藥物制劑為開心散。

4.一種藥物制劑的標準特征圖譜的構建方法，包括：通過采用權利要求1-2任一所述的藥物制劑的HPLC特征圖譜的檢測方法分別對多個藥物制劑樣品進行檢測，獲得多個藥物制劑的特征圖譜生成共有對照特征圖譜，以圖譜中均存在的色譜峰作為共有特征峰，確定共有特征峰的相對保留時間，建立藥物制劑的標準特征圖譜；所述藥物制劑為開心散。

5.根據權利要求4所述的一種藥物制劑的標準特征圖譜的構建方法，其特征在于，所述藥物制劑的標準特征圖譜符合以下條件中任一項或多項：

B1）所述藥物制劑的標準特征圖譜包括7個共有特征峰，以2號峰為參照峰S1峰，保留時間為1.000，其他6個共有特征峰的相對保留時間的規定值依次為保留時間為0.665的1號峰、保留時間為1.183的3號峰、保留時間為1.326的4號峰、保留時間為1.346的5號峰、保留時間為2.041的6號峰、保留時間為2.458的7號峰，上述除2號峰外6個共有特征峰的相對保留時間的規定值的相對偏差均≤±5%；

B2）所述藥物制劑的標準特征圖譜與參照物溶液的特征圖譜進行比較，定位確定所述1號峰為遠志口山酮Ⅲ的特征峰，所述2號峰為3,6’-二芥子酰基蔗糖的特征峰，所述3號峰為細葉遠志苷A的特征峰，所述4號峰為人參皂苷Rg₁的特征峰，所述5號峰為人參皂苷Re的特征峰，所述6號峰為β-細辛醚的特征峰，所述7號峰為茯苓酸的特征峰。

6.一種藥物制劑的特征圖譜的質量控制方法，包括：采用權利要求1-2任一所述的藥物制劑的特征圖譜的檢測方法獲得的藥物制劑的特征圖譜，與采用權利要求4-5任一所述的藥物制劑的標準特征圖譜的構建方法獲得的藥物制劑的標準特征圖譜，將藥物制劑的色譜峰與相應共有特征峰進行相對保留時間的相似度比較；所述藥物制劑為開心散。

7.一種藥物制劑中多味藥材的特征圖譜的篩選方法，所述藥物制劑為開心散，包括下列步驟：

A）缺樣陰性樣品溶液的制備：將包含茯苓、人參、遠志、石菖蒲4味藥材的藥物制劑樣品分別去除其中任一1味藥材，按權利要求1-2任一所述的藥物制劑的特征圖譜的檢測方法中制備供試品溶液相同步驟進行制備，分別獲得4種缺樣陰性溶液：茯苓陰性溶液、人參陰性溶液、遠志陰性溶液、石菖蒲陰性溶液；

B）測定：采用與權利要求1-2任一所述的藥物制劑的特征圖譜的檢測方法中相同色譜條件的高效液相色譜法分別測定4種缺樣陰性溶液，分別獲得4種缺樣陰性溶液的特征圖譜；

C）質量檢測：將4種缺樣陰性溶液的特征圖譜，分別與權利要求4-5任一所述的藥物制劑的標準特征圖譜的構建方法建立的藥物制劑的標準特征圖譜進行比較，通過相對保留時間，指認出4種缺樣陰性溶液中相應單味藥材在藥物制劑的標準特征圖譜中的共有特征峰，從而對4種缺樣陰性溶液中相應單味藥材的特征圖譜中的特征峰進行歸屬定位。