[發明專利]卵巢干細胞在制備卵巢抗衰的藥物中的用途有效
| 申請號: | 202111139153.0 | 申請日: | 2021-09-28 |
| 公開(公告)號: | CN113633754B | 公開(公告)日: | 2022-08-30 |
| 發明(設計)人: | 張冬久;鐘春秀 | 申請(專利權)人: | 上海攬微賽爾生物科技有限公司 |
| 主分類號: | A61K38/10 | 分類號: | A61K38/10;A61K45/06;C12N5/071;A61P15/08;A61K35/54 |
| 代理公司: | 嘉興倍創專利代理事務所(普通合伙) 33395 | 代理人: | 雷慧敏 |
| 地址: | 201600 上海市松江區*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 卵巢 干細胞 制備 藥物 中的 用途 | ||
1.卵巢干細胞聯合LC-2多肽在制備治療卵巢早衰的藥盒中的用途,其特征在于:所述LC-2多肽的序列如FQGIVQLPYWPSFAMW所示;所述卵巢干細胞采用如下的方法分離培養制備得到:取離體的卵巢組織,PBS沖洗3遍,隨后切成0.1*0.1*0.1cm3的組織塊,將3倍于組織體積的膠原酶加入皿中,吹打并轉移至離心管,放入37℃ 培養箱;消化30min, 每隔10min充分吹打,直至組織塊溶解,消化液變渾濁;加入DMEM+10%胎牛血清+1%青霉素、鏈霉素充分混勻,以1500r/min離心5min,棄上清,加入適量PBS重懸細胞3次,用200目濾網過濾,離心,離心后加入5ml 干細胞培養液于培養皿,37℃、0.5%CO2的培養箱培養,其中干細胞培養液組成為1000mL:150mL KnockOut血清替代物+10mL HyClone非必須氨基酸+7g谷氨酰胺+1mLβ-巰基乙醇+4mg β-FGF+10mL青霉素-鏈霉素溶液100X+2mg輔酶Q10,DMEM補足到1000mL;隔天換液;待皿中細胞長到80%匯合度時即消化傳代;棄除培養液,加入PBS洗3次,加入0.25%胰酶覆蓋皿底,置于37℃培養箱中待大部分貼壁細胞變圓變亮,加入等量含10%胎牛血清的DMEM+10%胎牛血清+1%青霉素、鏈霉素中止消化,用吸管反復輕柔吹打皿底,使呈單細胞懸液;以1500r/min離心5min,棄上清,加入適量PBS重懸細胞3次,加入前述的干細胞培養液,按1:3的比例傳代到P3代,收獲集落細胞即為卵巢干細胞。
2.如權利要求1所述的用途,其特征在于所述藥盒中還含有藥學上可接受的載體。
3.如權利要求2所述的用途,其特征在于所述載體包括賦形劑。
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