[發明專利]與雞柔嫩艾美耳球蟲地克珠利耐藥性相關的SNP分子標記及其應用在審
| 申請號： | 202111129903.6 | 申請日： | 2021-09-26 |
| 公開（公告）號： | CN113817842A | 公開（公告）日： | 2021-12-21 |
| 發明（設計）人： | 索勛;劉賢勇;畢菲菲;郝振凱;孫霈;索靜霞;于詠蘭;余芳 | 申請（專利權）人： | 中國農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6888 | 分類號： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 孫怡 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 柔嫩 艾美耳球蟲 克珠利 耐藥性 相關 snp 分子 標記 及其 應用 | ||
1.與雞柔嫩艾美耳球蟲地克珠利耐藥性相關的SNP分子標記，其特征在于，其含有如SEQ ID NO.1所示序列第166位多態性為A/C的核苷酸序列。
2.根據權利要求1所述的SNP分子標記，其特征在于，所述SNP分子標記的多態性位點為A，對應于地克珠利敏感；多態性位點為C，對應于地克珠利耐藥。
3.用于擴增權利要求1或2所述的SNP分子標記的引物對，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2-3所示。
4.含有權利要求3所述引物對的試劑盒。
5.權利要求1或2所述的SNP分子標記或權利要求3所述的引物對或權利要求4所述的試劑盒在檢測雞柔嫩艾美耳球蟲地克珠利耐藥性中的應用。
6.權利要求1或2所述的SNP分子標記或權利要求3所述的引物對或權利要求4所述的試劑盒在篩選雞柔嫩艾美耳球蟲地克珠利耐藥蟲株中的應用。
7.權利要求1或2所述的SNP分子標記或權利要求3所述的引物對或權利要求4所述的試劑盒在指導雞抗柔嫩艾美耳球蟲藥物使用中的應用。
8.一種檢測雞柔嫩艾美耳球蟲地克珠利耐藥性的方法，其特征在于，以待測雞柔嫩艾美耳球蟲的DNA或RNA為模板，采用SEQ ID NO.2-3所示引物對進行PCR擴增，根據PCR擴增產物的序列判斷待測雞柔嫩艾美耳球蟲是否具有地克珠利耐藥性。
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的反應程序包括：98℃，30-60s；98℃，15-30s；65℃，20-30s；72℃，25-35s，30-40個循環；72℃，5-10min。
10.根據權利要求8或9所述的方法，其特征在于，若PCR擴增產物中對應于SEQ ID NO.1所示序列第166位的核苷酸序列為A，則待測柔嫩艾美耳球蟲為地克珠利敏感蟲株，若PCR擴增產物中對應于SEQ ID NO.1所示序列第166位的核苷酸序列為C，則待測柔嫩艾美耳球蟲為地克珠利耐藥蟲株。
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