[發明專利]一種從草果中提取分離草果素的方法

在審

• 申請號: 202111127531.3
• 申請日: 2021-09-26
• 公開（公告）號: CN113636923A
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發明（設計）人: 黃鎖義;鄭皓元;黎威林;劉丁;陳石梅;李童;謝欣;林瑤;黃上峰;喻巧容
• 申請（專利權）人: 右江民族醫學院;成都普思生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07C45/79
• 分類號: C07C45/79;C07C47/46;A61P39/06
• 代理公司: 成都天嘉專利事務所(普通合伙) 51211
• 代理人: 向丹

本發明公開了一種從草果中提取分離草果素的方法，可實現草果藥材中抗氧化活性單體化合物的提取，并經MS、NMR等現代波譜技術和光譜技術對該活性單體化合物進行結構鑒定，確認為草果素，由此為研究草果水提取物抗氧化活性提供物質基礎，并有利于草果的進一步綜合開發利用。

技術領域

本發明是一種從草果中提取分離草果素的方法，具體涉及一種從草果中提取分離抗氧化活性物質草果素的方法，屬于中草藥提取技術領域。

背景技術

草果（學名：Amomum tsaoko Crevost et Lemarie）是姜科，豆蔻屬多年生草本植物，主要分布于中國云南、廣西、貴州等省區。草果是藥食兩用中的藥材大宗品種之一，主要作為香料應用于食品加工領域，也應用于中藥和其他領域。目前，隨著天然產物開發的不斷興起，草果作為重要的藥食兩用植物，由于具備廣泛的生物學活性和藥理作用，因此，對草果天然產物的開發利用將會進一步加大。

現有研究表明，草果的提取物具有一定的抗氧化活性，例如：黃比翼等在“不同極性溶劑的草果提取物抗氧化活性研究”（《右江名族醫學院學報》，2021年2月，第43卷 第1期，37-40）中用乙醇提取草果得到的浸膏，稀釋后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及水部位，并采用紫外分光光度法來測定草果提取物對ABTS⁺自由基、羥自由基和Fe²⁺螯合的清除能力，結果表明，不同極性溶劑的草果提取物都具有良好的抗氧化活性。但現有研究并未闡明其抗氧化活性的物質基礎，因此，為進一步的提高草果在抗氧化活性方面的綜合開發及利用，如何實現草果提取物中抗氧化活性單體化合物的提取、分離和純化是關鍵。

發明內容

本發明的目的在于提供一種從草果中提取分離草果素的方法，可實現草果藥材中抗氧化活性單體化合物的提取，并經MS、NMR等現代波譜技術和光譜技術對該活性單體化合物進行結構鑒定，確認為草果素，由此為研究草果水提取物抗氧化活性提供物質基礎，并有利于草果的進一步綜合開發利用。

本發明通過下述技術方案實現：一種從草果中提取分離草果素的方法，包括以下步驟：

A.以草果藥材為原料，粉碎后用乙醇回流提取，再經減壓濃縮后得到濃縮液；

B.將濃縮液稀釋后用乙酸乙酯進行萃取，得到乙酸乙酯提取物，濃縮制得乙酸乙酯提取物浸膏；

C.取乙酸乙酯提取物浸膏，經硅膠柱層析分離和C18柱反向分離后，得到草果素。

所述步驟A中，用質量濃度為95%的乙醇回流提取2～3次，每次回流提取時間控制在1.5～2h。

所述步驟A中，將回流提取得到的提取液在50～55℃下減壓濃縮至無醇后，得到所述濃縮液。

所述步驟B中，將濃縮液加水稀釋2～3倍后，取等體積的乙酸乙酯萃取2次，得到乙酸乙酯提取物。

所述步驟B中，將乙酸乙酯提取物在45℃下減壓濃縮制得乙酸乙酯提取物浸膏。

所述步驟C中，取乙酸乙酯提取物浸膏用其質量1～2倍的硅膠拌樣，拌樣物在40℃下鼓風干燥恒重，得到干燥的硅膠拌樣物，再進行硅膠柱層析分離。

所述步驟C中，硅膠拌樣物進行正相硅膠柱層析，以10～20倍的硅膠為填料，濕法裝柱，干法上樣，用體積比為100︰0～30︰1的二氯甲烷-甲醇為洗脫劑進行常壓洗脫，分管收集，每管約100mL，再進行薄層色譜分析，以體積比為20︰1的二氯甲烷-甲醇為展開劑，在254nm的紫外光下檢視暗斑結果，將含有目標化合物的收集液合并后，在45℃下減壓濃縮至浸膏。

所述步驟C中，C18柱反向分離時，采用體積比為50︰50的甲醇-水為流動相，紫外光為254nm。

本發明與現有技術相比，具有以下優點及有益效果：