[發明專利]大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段及其干擾載體和應用

在審

• 申請號: 202111117687.3
• 申請日: 2021-09-23
• 公開（公告）號: CN113832166A
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發明（設計）人: 蘇曉峰;劉璐;吳思源;王琦;程紅梅
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院生物技術研究所
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12N15/113;C12N15/84;C12N15/83;A01H5/00;A01H6/82
• 代理公司: 北京思元知識產權代理事務所(普通合伙) 11598
• 代理人: 余光軍;霍雪梅

1.大麗輪枝菌(Verticillium dahliae)PEX30基因抗病原菌靶基因片段，其特征在于：其核苷酸序列為SEQ ID No.7、SEQ ID No.8或SEQ ID No.9所示。

2.按照權利要求1所述的大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段，其特征在于：其核苷酸序列為SEQ ID No.7所示。

3.由權利要求1或2所述的大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段所轉錄的dsRNA。

4.含有權利要求1或2所述的大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段的RNA干擾載體。

5.一種構建權利要求4所述的RNA干擾載體的方法，其特征在于，包括：將權利要求1或2所述的大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段插入到Gateway干擾載體，即得；

其中，通過BP反應，將權利要求1或2所述的大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段連接至pDONR207中，再通過LR反應，將其構建至pK7GWIWG2(I),0中得到Gateway干擾載體。

6.權利要求1或2所述的大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段在提高植物對大麗輪枝菌所導致病害抗性中的應用。

7.按照權利要求6所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：(1)構建含有權利要求1或2所述的大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段的Gateway干擾載體；(2)將所構建的Gateway干擾載體轉化到植物或植物細胞中；(3)篩選獲得對大麗輪枝菌所導致病害抗性提高的轉基因植物。

8.權利要求4所述RNA干擾載體在提高植物對大麗輪枝菌所導致疾病的抗性中的應用，其特征在于，包括：(1)將所述RNA干擾載體轉化到植物或植物細胞中；(2)篩選獲得對大麗輪枝菌所導致疾病的抗性提高的轉基因植物。

9.一種培育抗大麗輪枝菌所導致病害的轉基因植物新品種的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)構建含有權利要求1或2所述的大麗輪枝菌PEX30基因抗病原菌靶基因片段的RNA干擾載體；(2)將所構建的RNA干擾載體轉化到植物或植物細胞中；(3)篩選獲得對大麗輪枝菌所導致疾病的抗性提高的轉基因植物新品種。

10.按照權利要求6或8所述的應用，其特征在于，所述植物包括但不限于煙草、棉花、番茄、馬鈴薯、甜瓜、西瓜、黃瓜或花生中的任意一種或多種。