[發(fā)明專利]安石榴苷在抗日本腦炎病毒感染中的潛在應用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202111114682.5
• 申請日: 2021-09-23
• 公開（公告）號: CN113876794A
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發(fā)明（設計）人: 王澤方;張兵;李敏敏;蘇伶?zhèn)?/a>;封守琴
• 申請（專利權）人: 天津國際生物醫(yī)藥聯(lián)合研究院
• 主分類號: A61K31/7048
• 分類號: A61K31/7048;A61P31/14
• 代理公司: 北京德恒律治知識產權代理有限公司 11409
• 代理人: 章社杲;盧軍峰

本發(fā)明提供了一種針對日本腦炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)中存在的，對日本腦炎病毒生長復制極其重要的酶，即非結構蛋白NS2B(H)?NS3pro雙組分蛋白酶的抑制劑，該抑制劑的名稱為安石榴苷，對日本腦炎病毒中的NS2B(H)?NS3pro的絲氨酸蛋白酶活性具有顯著的抑制作用，因此本發(fā)明提供的抑制劑能夠用來制備針對日本腦炎病毒中NS2B(H)?NS3pro雙組分蛋白酶的小分子抑制劑，有望成為抗日本腦炎病毒感染的潛在藥物。

技術領域

本發(fā)明涉及藥學的技術領域，具體說是安石榴苷在抗日本腦炎病毒感染中的應用。

背景技術

日本乙型腦炎(JE)是由日本腦炎病毒(JEV,Japanese encephalitis virus)引起的病毒性疾病，是目前全球最重要的病毒性腦炎，對人類的健康，特別是免疫性較低的兒童和青少年，具有極大的威脅。其主要由蚊子進行傳播，豬和水禽類動物充當JEV的快速擴增宿主，造成全球每年將近有67,900例人類病例，其中有50％的病例在中國出現(xiàn)。由于目前并沒有針對乙腦病毒的特效藥，因此，一旦感染，腦炎患者的死亡率為30％。即便幸存，由于JEV對而大約50％的患者會出現(xiàn)永久性神經系統(tǒng)損傷，包括記憶喪失，認知性行為障礙，抽搐，嚴重者甚至會造成終身癱瘓。面對JEV的嚴重挑戰(zhàn)，在JEV疫苗接種率不斷提高的情況下，發(fā)病率仍然高居不下，是亞洲地區(qū)需要面對的公共衛(wèi)生問題。除了人類健康外，日本腦炎病毒也給畜牧養(yǎng)殖業(yè)帶來了極大挑戰(zhàn)，JEV病毒感染對豬的影響尤其明顯。雖然成年的養(yǎng)殖豬感染JEV后很少會出現(xiàn)癥狀性疾病，但它被認為是一個導致流產、死胎和造成幼豬出生缺陷的重大繁殖問題。被感染的小豬則會表現(xiàn)出致命的神經系統(tǒng)疾病。馬也會被感染，導致非特異性癥狀，包括發(fā)熱，但偶爾會導致明顯的神經系統(tǒng)疾病，在極端情況下會導致死亡。因此，關于日本腦炎病毒的疫苗和抑制劑的研究在目前來說萬分重要。

日本腦炎病毒的雙組分蛋白酶NS2B(H)-NS3 pro負責將該病毒的多蛋白前體切割加工為參與病毒致病的成熟病毒蛋白。NS3蛋白N端的三分之一(180個殘基)代表其蛋白酶結構域NS3(pro)，它在病毒繁殖過程中與C端三分之二部分的RNA解旋酶協(xié)同工作。NS3蛋白水解結構域包含H51、D75和S135的經典催化三聯(lián)體，并且在NS2B/NS3多蛋白連接處的自催化蛋白水解切割導致NS2B和NS3形成非共價蛋白復合物。早期研究表明，NS2B的約35-48個氨基酸殘基長的中央親水區(qū)NS2B(H)直接與NS3(pro)相互作用，并促進NS3(pro)折疊成具有催化活性的構象。NS2B(H)-NS3對于包括日本腦炎病毒在內的黃病毒屬病毒的復制，致病性以及相關蛋白質的加工成熟都起到不可或缺的作用，因此，NS2B(H)-NS3可作為研究日本乙型腦炎病毒的抑制劑的一個重要靶標。

安石榴苷，英文名是Punicalagin，是石榴汁中發(fā)現(xiàn)的抗氧化劑鞣花單寧，具有已知的抗增殖或抗血管生成特性，可對抗多種癌細胞系，包括白血病、神經膠質瘤和前列腺癌細胞。而且，安石榴苷水溶性好，人體容易吸收，攝入體內后，可以水解成小分子多酚類物質，所以安石榴苷的生物利用度相對于其他的石榴提取物更高。但至今，安石榴苷在抗日本腦炎病毒感染中的應用未見報道。

發(fā)明內容

針對相關技術中的問題，本發(fā)明提供安石榴苷在抗日本腦炎病毒感染中的應用。

本發(fā)明還提供了針對日本腦炎病毒雙組分蛋白酶NS2B(H)-NS3 pro的抑制劑。

本發(fā)明所涉及安石榴苷CAS號為65995-63-3，購買于成都瑞芬思生物科技有限公司。在分子水平上，通過設立陰性對照，發(fā)現(xiàn)安石榴苷對日本腦炎病毒雙組分蛋白酶NS2B(H)-NS3 pro有很好的抑制活性，因此該化合物有希望成為抑制日本腦炎病毒感染的潛在藥物。