[發明專利]一種樣品前處理方法及其應用

在審

• 申請號: 202111112653.5
• 申請日: 2021-09-23
• 公開（公告）號: CN113846087A
• 公開（公告）日: 2021-12-28
• 發明（設計）人: 紀偉;李媛媛;徐濤
• 申請（專利權）人: 生物島實驗室;中國科學院生物物理研究所
• 主分類號: C12N13/00
• 分類號: C12N13/00;G01N33/53;G01N33/531;G01N33/569
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 李渤

1.一種包含生物分子的樣品的前處理方法，其包括以下步驟：

(1)將待測樣品置于保存液中；

(2)對保存液施加外力，以降低非特異性結合。

2.根據權利要求1所述的方法，步驟(2)進一步包括：通過所施加的外力促進生物分子特異性結合。

3.根據權利要求1或2所述的方法，所述外力是超聲波。

4.根據權利要求3所述的方法，所述超聲波的頻率為20-130kHz，優選地，所述超聲波的頻率為25-90kHz；優選地，所述超聲波的頻率為40-60kHz。

5.根據權利要求3或4所述的方法，所述超聲波的作用時間為5-30分鐘。

6.根據權利要求3-5任一項所述的方法，所述超聲波的功率為10-500W，優選為60-150W。

7.根據權利要求1或2所述的方法，所述外力為渦旋振蕩、施加電場和施加高壓中的一種或多種。

8.根據權利要求1所述的方法，其中所述生物分子來源于微生物，所述微生物選自細菌、病毒、真菌、放線菌、立克次氏體、支原體、衣原體、螺旋體中的一種或多種。

優選地，所述病毒為選自口蹄疫病毒、流感病毒、冠狀病毒、腸道病毒和豬瘟病毒的一種或多種；

優選地，所述冠狀病毒為選自新型冠狀病毒、SARS冠狀病毒、中東呼吸綜合征(MERS)冠狀病毒、229E冠狀病毒、NL63冠狀病毒、OC43冠狀病毒、HKU1冠狀病毒的一種或多種；

優選地，所述生物分子為選自刺突蛋白S、核衣殼蛋白N、膜蛋白M、包膜蛋白E和血凝素酯酶HE的冠狀病毒蛋白抗原的一種或多種。

9.根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其還包括在所述外力處理之前對所述待測樣品進行滅活處理；

優選地，所述滅活處理為將所述待測樣品在56-60℃下保持30-60分鐘；

更優選地，所述滅活處理為將所述待測樣品在56℃下保持30分鐘。

10.根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其中所述樣本選自咽拭子、肺泡灌洗液、痰液、口腔拭子、唾液、血液、尿液、腦脊髓液、組織、陰道拭子、體液、汗液、糞便、肛拭子、淚液、食品、土壤、水體。

11.根據權利要求1至9中任一項所述的方法，其還包括在所述外力處理之后對經外力處理的包含生物分子的樣品保存液進行離心處理；

優選地，所述離心力為1000g～30000g，優選為20000g；所述離心時間為3～30分鐘，優選為5～10分鐘。

12.一種用于非疾病診斷目的的生物分子的檢測方法，包括以下步驟：

(1)采用權利要求1-11任一項所述的方法對待測樣品進行前處理；

(2)對保存液中的蛋白抗原進行檢測。

13.根據權利要求1-12任一項所述的方法在生物分子檢測中降低本底噪聲的應用。

14.根據權利要求1-12任一項所述的方法在生物分子檢測中提高生物分子特異性結合的應用。

15.根據權利要求13或14所述的應用，所述生物分子為新型冠狀病毒。