[發明專利]一種超臨界流體色譜分離方法及裝置

在審

• 申請號: 202111105590.0
• 申請日: 2021-09-22
• 公開（公告）號: CN114019035A
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 金郁;戴瑩萍;傅青;柯燕雄
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海翼勝專利商標事務所(普通合伙) 31218
• 代理人: 翟羽

本申請公開了一種超臨界流體色譜分離方法及裝置，超臨界流體色譜分離方法包括：將樣品放置于預分離裝置中；將預分離裝置的一端與色譜柱柱前管路連接，預分離裝置的另一端與超臨界流體制備色譜柱連接；以超臨界二氧化碳作為提取溶劑，對樣品進行預分離，將預分離后目標組分加載至超臨界流體制備色譜柱；將色譜柱柱前管路連接至所述超臨界流體制備色譜柱；以超臨界二氧化碳和改性劑為流動相，分離目標組分。本申請所采用的超臨界流體色譜分離方法，能夠一步完成樣品的提取、前處理、上樣和分離，解決超臨界流體色譜中樣品溶解試劑的強度和粘度與流動相不匹配的問題，消除上樣溶劑和樣品中雜質對超臨界流體色譜分離的干擾。

技術領域

本申請涉及色譜技術領域，具體涉及一種超臨界流體色譜分離方法及裝置。

背景技術

近年來，以環境友好的亞臨界/超臨界二氧化碳(Sc-CO₂)為流動相的超臨界流體色譜(Supercritical Fluid Chromatography，SFC)被認為是一種綠色環保，高效快速的分離技術。與液相色譜(Liquid Chromatography，LC)相比，SFC具有更快的流速(大約是LC的3倍)，更高的分離通量以及更低的有機溶劑消耗。特別是制備型SFC，因分離條件溫和，分離快速，后處理簡便，在樣品純化方面有著一定的優勢。

然而，樣品的溶解一直是SFC分離的難點問題。SFC的流動相由超臨界CO₂和一定比例的改性劑組成。樣品大多數溶解在改性劑中，其強度和粘度與SFC流動相不匹配，常導致譜帶展寬，分離度下降，重復性變差。這個問題在制備SFC上更為突出，甚至樣品會在進樣后有析出再溶解的過程，導致色譜峰嚴重失真。另外，在分離復雜樣品時，雜質的干擾常常成為SFC高效分離的阻礙。復雜樣品的極性分布范圍較廣，增加了樣品溶解的難度，而且有些雜質在SFC上不易洗脫，也給分離造成了困擾。綜上所述，迫切需要開發一種同時解決制備SFC中進樣溶劑不匹配和雜質干擾問題的方法。

發明內容

本申請提供一種超臨界流體色譜分離方法及裝置，可以一步實現樣品的提取、前處理、上樣和分離。

本申請提供一種超臨界流體色譜分離方法，包括：將樣品放置于預分離裝置中；將預分離裝置的一端與色譜柱柱前管路連接，預分離裝置的另一端與超臨界流體制備色譜柱連接；以超臨界二氧化碳作為提取溶劑，對樣品進行預分離，將預分離后目標組分加載至超臨界流體制備色譜柱；將色譜柱柱前管路連接至所述超臨界流體制備色譜柱；以超臨界二氧化碳和改性劑為流動相，分離目標組分。

可選的，在本申請的一些實施例中，預分離包括提取、前處理和上樣。

可選的，在本申請的一些實施例中，樣品與色譜填料混合后放置于預分離裝置中。

可選的，在本申請的一些實施例中，提取溶劑還包括改性劑，改性劑占超臨界二氧化碳與改性劑總流量的0～10％。

可選的，在本申請的一些實施例中，改性劑包括甲醇、乙醇、異丙醇或乙腈中的至少一種。

可選的，在本申請的一些實施例中，色譜填料包括硅膠基質填料或大孔樹脂填料。

可選的，在本申請的一些實施例中，色譜填料的粒徑范圍可以為10～60μm，也可以為20～50μm，還可以為30～40μm。

可選的，在本申請的一些實施例中，樣品包括白花蛇舌草或高良姜或其提取物。

可選的，在本申請的一些實施例中，樣品和色譜填料的質量比可以為1:(1.5～10)，也可以為1:(2～9)，還可以為1:(3～8)。

可選的，在本申請的一些實施例中，在預分離的條件中，超臨界二氧化碳的流速范圍可以為5～50mL/min，也可以為10～40mL/min，還可以為20～30mL/min。