[發(fā)明專利]一種利用微生物趨向性判斷剩余油的方法及強化采油方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202111101962.2
• 申請日: 2021-09-18
• 公開（公告）號: CN115839226A
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發(fā)明（設計）人: 曹功澤;劉濤;趙紅雨;趙潤林;鄭新;高陽;譚曉明;宋欣;陳瓊瑤;張吉星
• 申請（專利權）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司勝利油田分公司石油工程技術研究院
• 主分類號: E21B43/22
• 分類號: E21B43/22;C12Q1/6851;C12Q1/689
• 代理公司: 北京世譽鑫誠專利代理有限公司 11368
• 代理人: 仲伯煊

1.一種利用微生物趨向性判斷剩余油的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)試驗油藏的篩選；

(2)模擬實驗；

(3)嗜烴菌菌濃與剩余油關系的確定；

(4)試驗油藏剩余油的確定。

2.如權利要求1所述的一種利用微生物趨向性判斷剩余油的方法，其特征在于，步驟(1)中試驗油藏篩選的條件為：試驗油藏為正常生成的油藏，油藏溫度＜90℃、原始地層壓力＜20MPa、滲透率＞100×10^-3μm²、地層水礦化度＜200000mg/L、原油粘度＜50000mPa·s、原始含油飽和度＞50％。

3.如權利要求1所述的一種利用微生物趨向性判斷剩余油的方法，其特征在于，步驟(2)具體步驟為：

(21)將試驗油藏的填砂巖心進行洗油，制成Φ38×600mm的標準巖心；

(22)抽真空、飽和試驗油藏的地層水；

(23)飽和試驗油藏的脫水脫氣的原油；

(24)老化放置7d后一次水驅，巖心水驅至不同剩余油飽和度；

(25)向一次水驅后的巖心中注入嗜烴菌，注入量為0.1PV，注入后跟蹤檢測產(chǎn)出液中嗜烴菌的數(shù)量。

4.如權利要求3所述的一種利用微生物趨向性判斷剩余油的方法，其特征在于，所述嗜烴菌為烴降解菌、互營單胞菌、毛螺菌、嗜鹽單胞菌、海桿菌、嗜烴假單胞菌、產(chǎn)氫菌中的一種；所述嗜烴菌優(yōu)選烴降解菌或海桿菌。

5.如權利要求3所述的一種利用微生物趨向性判斷剩余油的方法，其特征在于，步驟(25)中所述的嗜烴菌數(shù)量的確定是利用分子生物學方法的熒光定量PCR的方法進行跟蹤判斷，通過功能基因拷貝數(shù)的數(shù)量判斷其濃度的高低，其具體步驟為：

(251)熒光定量PCR反應體系配置：

嗜烴菌定量檢測反應體系20μL，體系包括熒光定量PCR反應酶體系10μL，0.02nmol/μL上下游引物各0.2μL、模板DNA 1μL，無菌水8.6μL，每個樣品做3組平行實驗，反應液配置在96孔無菌反應板中；

構建標準曲線的標準質粒反應體系20μL，體系組成同上，其中模板DNA分別選擇1μL的1×10²copy/mL、1×10⁴copy/mL、1×10⁶copy/mL和1×10⁸copy/mL 4個梯度的標準質粒溶液，每個標準質粒做3組平行實驗；

(252)熒光定量PCR擴增步驟

當反應引物Tm值大于等于60℃時，擴增包括：

步驟1：95℃預變性3min；

步驟2：95℃變性10s，60℃退火30s，步驟2循環(huán)40次，60℃反應時，檢測熒光信號；

當反應引物Tm值小于60℃時，擴增包括:

S1：95℃預變性3min；

S2：95℃變性10s，退火溫度30s，72℃延伸30s，步驟2循環(huán)40次，72℃反應時，檢測熒光信號；

(253)熒光定量PCR數(shù)據(jù)分析:

以標準質粒拷貝濃度的對數(shù)值為橫坐標，以測得的Ct值為縱坐標，繪制標準曲線，對嗜烴菌樣品進行定量時，根據(jù)樣品的Ct值，即可在標準曲線中得到樣品中嗜烴菌基因拷貝濃度。

6.如權利要求3所述的一種利用微生物趨向性判斷剩余油的方法，其特征在于，步驟(25)中嗜烴菌注入濃度為log功能基因拷貝數(shù)在8～9。

7.如權利要求1所述的一種利用微生物趨向性判斷剩余油的方法，其特征在于，步驟(3)中根據(jù)產(chǎn)出液中嗜烴菌數(shù)量的多少判斷嗜烴菌菌濃和油水井間剩余油飽和度的關系，根據(jù)嗜烴菌菌濃和剩余油的關系，判斷油水井間剩余油飽和度；

產(chǎn)出液中嗜烴菌濃度與油水井間剩余油飽和度的關系如下表所示，其中：嗜烴菌濃度為log功能基因拷貝數(shù)；

產(chǎn)出液中嗜烴菌濃度與油水井間剩余油飽和度的對應關系表