[發(fā)明專利]大花獨蒜蘭丁二酸類化合物及其提取方法和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111096568.4
• 申請日: 2021-09-18
• 公開（公告）號: CN113773354B
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發(fā)明（設計）人: 吳沙沙;倪林;翟俊文;蘭思仁;李威;吳美婷;彭東輝;秦思;韓茹;肖云
• 申請（專利權）人: 福建農(nóng)林大學
• 主分類號: C07H15/203
• 分類號: C07H15/203;C07H1/08;A61P1/16;A61P35/00;A61K31/7034
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 林文弘;蔡學俊

本發(fā)明公開了大花獨蒜蘭丁二酸類化合物及其提取方法和其藥物組合物與用途，其提取方法具體為大花獨蒜蘭的新鮮假鱗莖切碎，烘干至恒重，將干燥后的樣品經(jīng)粉碎機粉碎至粉末狀，將粉末過四號篩，用75%甲醇回流提取2次，每次2?h，減壓濃縮得浸膏。將浸膏溶解于24?L純水中，選用大孔吸附樹脂D101用乙醇?水系統(tǒng)進行洗脫，得到4個組分的浸膏，分別為DH?1、DH?2、DH?3、DH?4。其中60%乙醇部位的浸膏DH?3經(jīng)過多次柱層析（硅膠、凝膠），最后用HPLC純化，得到六個新丁二酸類化合物。本發(fā)明提取的得到新丁二酸類化合物可以用于制備治療肝癌藥物。

技術領域

本發(fā)明具體涉及大花獨蒜蘭Pleione?grandiflora有效成分中六個新丁二酸類化合物（1-6）及其提取方法，并應用于制備治療肝癌藥物。

背景技術

肝癌是全球第4大致死性惡性腫瘤，居全球癌癥病死率的第3位，惡性程度高，復發(fā)率高，易轉(zhuǎn)移，嚴重威脅著人類的健康和生命。雖然肝癌的化學藥物治療已經(jīng)有了很大的進展，但目前在臨床上仍沒有很好的藥物可以消除肝癌，且存在耐藥性強及毒副作用大等問題。因此，尋求結(jié)構(gòu)新穎且毒副作用小的新型抗肝癌藥物迫在眉睫。而且從植物中分離的新化合物是發(fā)現(xiàn)先導化合物的重要途徑。

大花獨蒜蘭Pleione?grandiflora是蘭科Orchidaceae獨蒜蘭屬Pleione植物，主產(chǎn)于我國云南省，資源豐富。丁二酸類化合物是蘭科植物中特有的成分，且報道有較強的抗肝癌活性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)大花獨蒜蘭提取物具有治療肝癌的作用，從有效部位中分離得到六個新的丁二酸類化合物，藥效學評價顯示它們具有很好的治療肝癌的作用。

本發(fā)明公開的大花獨蒜蘭丁二酸類化合物1-6的結(jié)構(gòu)式如下：

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本發(fā)明還提供了上述化合物的提取方法，包括以下步驟：

大花獨蒜蘭的新鮮假鱗莖50?kg切碎，于50℃烘箱中烘干至恒重（約18?h），將干燥后的樣品經(jīng)粉碎機粉碎至粉末狀，共得樣品7?kg。將粉末過四號篩，用75%甲醇回流提取2次，每次2?h，減壓濃縮得浸膏共2.45?kg。將浸膏溶解于24?L純水中，選用大孔吸附樹脂D101用乙醇-水系統(tǒng)進行洗脫，得到4個組分的浸膏，分別為DH-1（87.01?g）、DH-2（308.31g）、DH-3（156.44?g）、DH-4（145.00?g）。目標產(chǎn)物為中等極性成分，故選擇中等極性組分DH-3進一步分離提純，使用二氯甲烷-甲醇梯度（二氯甲烷:甲醇=20:1?~?1:1）通過硅膠柱色譜對餾分DH-3進行分離純化，得到7個餾分（DH-3.1?→?DH-3.7）。經(jīng)硅膠薄層色譜分析，選擇中等極性組分DH-3.3（17?g）進一步分離純化，使用PRP512A大孔吸附樹脂，用乙醇-水系統(tǒng)（乙醇:水=1:9?~?0:1）洗脫，得到10個級分（DH-3.3.1→?DH-3.3.10）。DH-3.3.3（3.35?g）通過Sephadex?LH-20柱色譜分離，用甲醇洗脫，得到7個組分（DH-3.3.3.1→?DH-3.3.3.7）。DH-3.3.3.3（586.5?mg）通過半制備型HPLC（流動相：甲醇水溶液，55%）純化，得到化合物1（28.0?mg）和2（8.2?mg）。DH-3.3.4（2.2?g）使用Sephadex?LH-20柱色譜純化，用甲醇洗脫獲得5個組分（DH-3.3.4.1–DH-3.3.4.5）。DH-3.3.4.2（366.4?mg）通過半制備型HPLC（流動相：MeOH水溶液，55%）純化，得到化合物3（4.1?mg）、4（24.3?mg）、5（12.1?mg）和6（4.4?mg）。